[發明專利]一種炎癥標志物聯合定量檢測試紙及其制備方法

有效

• 申請號: 201810746660.2
• 申請日: 2018-07-09
• 公開（公告）號: CN109001464B
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 于龍波;于永濤;黎權;劉日俊
• 申請（專利權）人: 廣州華澳生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/533
• 代理公司: 蘇州攜智匯佳專利代理事務所(普通合伙) 32278
• 代理人: 溫明霞

一種炎癥標志物聯合定量檢測試紙，所述炎癥標志物為血清淀粉樣蛋白A、超敏C反應蛋白與降鈣素原，試紙條包括樣品墊、炎癥標志物抗體磁性稀土熒光微球標記墊、包被膜和吸水墊，包被膜上設有三條炎癥標志物定量檢測線和一條質控區C線，利用磁場將樣本中的被測物質濃縮后，利用低背景、高靈敏度的熒光免疫層析法，進行檢測被測物質，解決了POCT類產品靈敏度低的問題。可以避免免疫側向層析試劑檢測血液樣本時，為降低血液中其他物質的干擾。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，涉及基于用磁性稀土熒光微球作為示蹤標記物的炎癥標志物聯合定量檢測試紙及其制備方法，具體地說是，一種測定血液（血清、血漿、全血）中的血清淀粉樣蛋白A/超敏C反應蛋白/降鈣素原含量的檢測試劑卡。

背景技術

血清淀粉樣蛋白A（Serum Amyloid A Protein，SAA）是一種主要由肝細胞分泌的急性時相反應蛋白，屬于載脂蛋白家族中的異質類蛋白質，相對分子量約12000。SAA根據在體內表達情況，分為急性期SAA(acute SAA，A-SAA)和組成型SAA(constitutive SAA，C-SAA)。正常人體內SAA主要來源于肝細胞組成型表達的C-SAA，當機體受到感染、炎癥、損傷等刺激后產生一系列細胞因子，在細胞因子的調控下A-SAA水平迅速升高，成為此時體內主要的SAA。機體在急性炎癥(如外傷、感染等)反應過程中血液中SAA水平可超過正常值的1000倍以上，這種特性使得SAA成為目前最敏感的炎癥標志物之一。

超敏C反應蛋白（hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP）是血漿中的一種C反應蛋白，又稱為高敏C反應蛋白。超敏C反應蛋白的臨床指導作用主要表現在對心血管疾病，新生兒細菌感染，腎移植等方面。超敏C反應蛋白是由肝臟合成的一種全身性炎癥反應急性期的非特異性標志物, 是心血管事件危險最強有力的預測因子之一。

降鈣素原（Procalcitonin，PCT）能反映全身炎癥反應的活躍程度，當嚴重細菌、真菌、寄生蟲感染以及膿毒癥和多臟器功能衰竭時血漿中的PCT水平升高，在這個過程中細菌內毒素的誘導擔任了至關重要的作用。而自身免疫、過敏和病毒感染及局部有限的細菌感染、輕微的感染和慢性炎癥不會導致血漿中的PCT水平升高。各類研究表明，PCT是細菌感染和膿毒癥的良好標記物，是臨床診斷中的一個重要工具。

目前臨床診斷應用最廣泛的是采用進口試劑檢測血清和血漿中的血清淀粉樣蛋白A/超敏C反應蛋白/降鈣素原。現市面上的試劑盒檢測操作復雜，費時，不宜作為普通的篩查，只能用作確診試驗。同時，與此同時市面上的樣本進行稀釋后進行測試而造成的靈敏度偏低。

發明內容

為解決以上問題，方便測試人血清淀粉樣蛋白A/超敏C反應蛋白/降鈣素原檢測水平的需求，本發明提供了一種簡單、可靠、成本低廉、靈敏度高的一種炎癥標志物聯合定量檢測試紙；本檢測方法利用磁場將樣本中的被測物質濃縮后，利用低背景、高靈敏度的熒光免疫層析法，進行檢測被測物質，解決了POCT類產品靈敏度低的問題。可以避免免疫側向層析試劑檢測血液樣本時，為降低血液中其他物質的干擾。

為了達到本發明的目的，本發明技術方案如下：一種炎癥標志物聯合定量檢測試紙，所述炎癥標志物為血清淀粉樣蛋白A、超敏C反應蛋白與降鈣素原，所述炎癥標志物聯合定量檢測試紙包括盒體，所述盒體包括底板與盒蓋，所述盒體內設有檢測試紙，所述檢測試紙下方設有底板，檢測試紙上方與盒蓋連接；所述盒蓋設有通孔區；所述通孔區設有加樣孔和結果觀察窗口；所述檢測試紙上方設有檢測區，檢測區與通孔區相對應；所述檢測區包括樣品墊、炎癥標志物抗體磁性稀土熒光微球標記墊、包被膜和吸水墊，所述包被膜上設有三條炎癥標志物聯合定量檢測線和一條質控區C線，所述檢測線與質控區C線平行排列。

進一步，所述炎癥標志物抗體磁性稀土熒光微球由高分子材料包裹磁性稀土熒光復合物，所述磁性稀土熒光微球的的球徑為 10-500nm，所述熒光發射波長范圍為 400-800nm，納米微球表面修飾活性基團為為氨基、羧基或巰基。