[發明專利]一種人工生物硬腦膜及其制備方法

有效

• 申請號: 201810743053.0
• 申請日: 2018-07-09
• 公開（公告）號: CN108815578B
• 公開（公告）日: 2020-07-17
• 發明（設計）人: 石凌鋒;陶秀梅;陳鵬;尚麗霞
• 申請（專利權）人: 北京諾康達醫藥科技股份有限公司
• 主分類號: A61L27/50
• 分類號: A61L27/50;A61L27/20;A61L27/24
• 代理公司: 北京精金石知識產權代理有限公司 11470
• 代理人: 張黎

1.一種人工生物硬腦膜，其特征在于，所述的人工生物硬腦膜的原料由細菌纖維素和膠原蛋白組成；

所述人工生物硬腦膜的制備方法，包括以下步驟：

1)細菌纖維素膜的發酵制備：微生物菌種活化，擴大培養，得到種子液，并將種子液接種至發酵培養基中培養，得到液面上層生成一層細菌纖維素膜的發酵液，將細菌纖維素膜取出待用；

2)細菌纖維素膜的純化處理：清洗步驟1)得到的細菌纖維素膜，然后放入無機堿溶液中，進行升溫，攪拌后取出，再放入檸檬酸溶液中攪拌，再次取出，清洗，得到純化的細菌纖維素膜；

3)將步驟2)得到的細菌纖維素膜干燥，得到硬腦膜基材，備用；

4)將牛跟腱酶解，酶解液離心取上清，鹽析出膠原蛋白，透析，溶解，得到膠原蛋白溶液；

5)將步驟3)的硬腦膜基材固定于靜電紡絲設備接收裝置上，將步驟4)的膠原蛋白溶液轉移到注射器中，進行靜電紡絲得到細菌纖維素人工生物硬腦膜中間品；

6)將步驟5)得到的細菌纖維素人工生物硬腦膜中間品壓縮并裁剪，經過內包、外包、滅菌、包裝后，即得；

所述細菌纖維素膜與膠原蛋白質量比為0.1-3.0:10；

步驟2)中所述升溫為升溫至60-120℃；

所述步驟4)中透析后的膠原蛋白用0.01mol/L-5.0mol/L檸檬酸溶液溶解。

2.根據權利要求1所述的人工生物硬腦膜，其特征在于，所述人工生物硬腦膜由細菌纖維素和膠原蛋白通過靜電紡絲的方式組合而成。

3.根據權利要求2所述的人工生物硬腦膜，其特征在于，所述細菌纖維素膜上下表面均勻復合上膠原蛋白。

4.根據權利要求3所述的人工生物硬腦膜，其特征在于，產生細菌纖維素膜的微生物菌種選自醋酸菌屬、根瘤菌屬、八疊球菌屬、假單胞菌屬、無色桿菌屬、產堿菌屬、氣桿菌屬、固氮菌屬和土壤桿菌屬中的一種。

5.根據權利要求4所述的人工生物硬腦膜，其特征在于，產生細菌纖維素膜的微生物菌種選自醋酸菌屬、根瘤菌屬和八疊球菌屬中的一種。

6.一種權利要求1-5任一項所述的人工生物硬腦膜的制備方法，包括以下步驟：

1)細菌纖維素膜的發酵制備：微生物菌種活化，擴大培養，得到種子液，并將種子液接種至發酵培養基中培養，得到液面上層生成一層細菌纖維素膜的發酵液，將細菌纖維素膜取出待用；

2)細菌纖維素膜的純化處理：清洗步驟1)得到的細菌纖維素膜，然后放入無機堿溶液中，進行升溫，攪拌后取出，再放入檸檬酸溶液中攪拌，再次取出，清洗，得到純化的細菌纖維素膜；

3)將步驟2)得到的細菌纖維素膜干燥，得到硬腦膜基材，備用；

4)將牛跟腱酶解，酶解液離心取上清，鹽析出膠原蛋白，透析，溶解，得到膠原蛋白溶液；

5)將步驟3)的硬腦膜基材固定于靜電紡絲設備接收裝置上，將步驟4)的膠原蛋白溶液轉移到注射器中，進行靜電紡絲得到細菌纖維素人工生物硬腦膜中間品；

6)將步驟5)得到的細菌纖維素人工生物硬腦膜中間品壓縮并裁剪，經過內包、外包、滅菌、包裝后，即得；

所述細菌纖維素膜與膠原蛋白質量比為0.1-3.0:10；

步驟2)中所述升溫為升溫至60-120℃；

所述步驟4)中透析后的膠原蛋白用0.01mol/L-5.0mol/L檸檬酸溶液溶解。

7.根據權利要求6所述的人工生物硬腦膜的制備方法，其特征在于，所述步驟2)中細菌纖維素放入無機堿溶液中后，升溫至70-120℃。

8.根據權利要求6所述的人工生物硬腦膜的制備方法，其特征在于，所述步驟2)中無機堿溶液為氫氧化鈉溶液，濃度為0.01-5.0mol/L。

9.根據權利要求6所述的人工生物硬腦膜的制備方法，其特征在于，所述步驟4)中溶解后膠原蛋白含量范圍為0.01％-2.0％。