[發明專利]可提高卵巢顆粒細胞活性的蒲公英提取物的制備及其應用

在審

• 申請號: 201810739219.1
• 申請日: 2018-07-06
• 公開（公告）號: CN108785354A
• 公開（公告）日: 2018-11-13
• 發明（設計）人: 邵輝;白莉
• 申請（專利權）人: 德州德潤生物科技有限公司
• 主分類號: A61K36/288
• 分類號: A61K36/288;A61P15/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種可提高卵巢顆粒細胞活性的蒲公英提取物的制備工藝及其應用，其特征是以干燥蒲公英為原料，通過提取、濃縮、酸化、上柱、純化得到蒲公英提取物，具體工藝步驟如下：

（1）蒲公英提取：將干燥蒲公英浸泡至溶劑純凈水中進行水煎，純凈水的質量為蒲公英全草的15～20倍，水煎提取的溫度控制在90～100℃，水煎次數為2次，每次3小時，然后將兩次得到的提取液合并，然后將提取液通過120目濾網過濾，得濾液；

（2）濃縮：將濾液進行減壓濃縮，除去溶劑，濃縮可溶性固形物為40%～45%，從而得到蒲公英濃縮液；

（3）酸化：將2%質量濃度的鹽酸加入至蒲公英濃縮液中，調PH至3～4，然后靜置24小時后進行離心，得到蒲公英上清液；

（4）上層析柱洗脫：將蒲公英上清液進行柱層析，采用DE-52纖維素，20mmol/ltris溶脹，用PH計調PH為8，使用20mmol/ltris洗脫柱子直到流出來的液體不再變色為止，再用3mol/l氯化鈉洗脫柱子，用純凈水洗脫至電導率為≤10us/cm，最后再用0.2mol/l氫氧化鈉洗脫，氫氧化鈉洗脫得到的液體進行濃縮；

（5）純化：步驟（4）得到濃縮液濃縮成原來體積的1/2后，取樣上柱采用葡聚糖凝膠柱Sephadex G-25 medium，用0.2mol/l的三羥甲基氨基甲烷水溶液洗脫，得到的洗脫液，進行濃縮到原來體積的1/5，再將其濃縮液上柱采用葡聚糖凝膠柱Sephadex G-25 superfine，分別用超純水洗脫得到的餾分進行低溫離心濃縮干燥，得到的蒲公英提取物。