[發明專利]一種以含萘雨水為底物的降解菌的篩選方法在審

申請號：	201810732738.5	申請日：	2018-07-05
公開（公告）號：	CN108823142A	公開（公告）日：	2018-11-16
發明（設計）人：	范曉丹;吳靜;張襄楷	申請（專利權）人：	天津城建大學
主分類號：	C12N1/36	分類號：	C12N1/36;C12N1/20;C12R1/01
代理公司：	天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201	代理人：	張宏祥
地址：	300384 天津市***	國省代碼：	天津;12
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摘要：
搜索關鍵詞：	降解菌雨水底物篩選富集培養活性污泥馴化多環芳烴污染固體培養基恒溫培養箱微生物資源污水處理廠液體培養基劃線分離降解菌株剩余污泥梯度馴化唯一碳源優勢菌落單菌落新途徑菌落稀釋分篩富含替代開發
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【權利要求書】：

1.一種以含萘雨水為底物的降解菌的篩選方法，具有如下步驟：

(1)梯度馴化

采用逐步提高萘濃度的方法對以含萘雨水為底物的活性污泥進行梯度馴化：

將沉降比為20％的活性污泥與取自瀝青路面的地表徑流雨水按質量比1:2混合，馴化期內，在雨水中首次加入萘的量為5mg/L，再將雨水與營養物質按體積比1:1混合；采用每隔2天排水1次，每次排100mL，同時進100mL含萘雨水，而后營養物質每天減少10％，10天后降為0，不再加營養物質，再每隔6天增加雨水中萘的濃度，每次增加的梯度為5mg/L，30天后增加到30mg/L為止；

(2)分離純化

取馴化的活性污泥稀釋10²～10⁵倍，將其涂布于固體培養基上，置于20-30℃恒溫培養箱中倒置平板培養1～4天，挑取數量最多的菌落，劃線分離純化；

(3)富集培養

挑取直徑為4mm范圍內純化優勢菌落置于250mL液體培養基中富集培養3天，得到以含萘雨水為唯一碳源的降解菌株。

2.根據權利要求1所述的一種以含萘雨水為底物的降解菌的篩選方法，其特征在于，所述步驟(1)的營養物質為：葡萄糖0.2g，(NH₄)₂SO₄ 0.3g，K₂HPO₄ 0.1g，KH₂PO₄ 0.1g，NaCl0.5g，MgSO₄ 30mg，CuSO₄.5H₂O 50mg，CaCl₂ 20mg，FeCl₃ 10mg，用蒸餾水定容至1000mL。