[發明專利]一種動物性食品中農藥殘留的LC-QToF-MS篩查分析方法

有效

• 申請號: 201810729412.7
• 申請日: 2018-07-05
• 公開（公告）號: CN108896694B
• 公開（公告）日: 2019-09-27
• 發明（設計）人: 翁瑞;邱靜;樓圣婷;錢永忠;宋月
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: G01N30/89
• 分類號: G01N30/89
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;王春霞

1.一種動物性食品中農藥殘留的LC-QToF-MS篩查分析方法，包括如下步驟：

（1）提取：將動物性食品試樣均質后與提取溶劑混合，經振蕩提取得到提取液，然后將所述提取液經除水、離心后，取上清液；

所述動物性食品包括雞肉、豬肉、牛肉、羊肉、鴨肉、鵝肉、雞肝、豬肝和羊肝中的至少一種；

所述提取溶劑為乙腈、含有1%甲酸的乙腈或含有1%乙酸的乙腈；

所述動物性食品試樣的質量與所述提取溶劑的體積比為1 g:2~4 mL；

所述振蕩提取的時間為10~60 s；

步驟（1）中，對所述提取液進行除水，在提取液中加入過量的無水MgSO₄、干燥的NaCl，以及質量比為2:1的檸檬酸鈉和檸檬酸二鈉鹽的混合物，所述除水時間為1~5 min；

對所述提取液進行離心的溫度為0~4 ℃，轉速為2500~5000 ×g，時間為5~10 min；

（2）凈化：將步驟（1）得到的上清液與凈化劑混合進行凈化，收集上清液，然后對得到的所述上清液依次進行加水稀釋、過濾，得到待測樣液a；

所述凈化劑包括EMR-Lipid；

步驟（2）中還包括對凈化后收集的所述上清液加入過量的無水硫酸鎂和干燥的氯化鈉進行干燥的步驟；

步驟（2）中還包括將所述凈化劑與水混合活化5~15 s的步驟；所述凈化劑的質量與所述水的體積比為0.4 g:5~10 mL；

步驟（1）得到的所述上清液的體積與所述凈化劑的質量比為5 mL:0.4~0.8 g；

所述凈化后采用離心收集上清液；所述離心的溫度為0~4 ℃，轉速為2500~5000 ×g，時間為5~10 min；

稀釋時，步驟（2）中收集的所述上清液與所述水的體積比為4:1~3；所述過濾采用0.22μm濾膜；

（3）色譜質譜檢測：對所述待測樣液a采用反相液相色譜法對農藥殘留進行分離；然后采用帶有ESI離子源的QToF-MS篩查分析所述農藥殘留，外標法進行定量，即得到動物性食品中的農藥殘留含量；

所述反相液相色譜法采用的色譜柱為C18反相液相色譜柱；

所述反相液相色譜法的色譜條件如下：流動相A為含5 mmol/L甲酸銨和0.1％甲酸的水溶液；流動相B為含5 mmol/L甲酸銨和0.1％甲酸的乙腈溶液；梯度洗脫程序為：0 min：5％B，0.5 min：5％B，3.5 min：50％B，17 min：100％B，20 min：100％B，20.1 min：5％B，后運行2 min；流速：0.4 mL/min；柱溫：35 ℃；進樣量：2 μL；

所述帶有ESI離子源的QToF-MS的質譜條件如下：QToF-MS質譜儀的離子源噴霧電壓：3500 V；離子源溫度：450 ℃；干燥氣流量6 L/min；鞘流氣流速11 L/min；鞘流氣溫度為350℃；噴霧氣壓35 psig；全掃描質荷比為50~1700，并采用內標參比溶液對儀器質量精度進行實時校正，通過Agilent MassHunter Workstation Software對質譜檢測進行數據采集與處理；

所述農藥殘留包括除草劑、殺蟲劑、殺菌劑、殺螨劑、殺鼠劑、殺線蟲劑和植物生長調節劑；

所述除草劑包括2,4-D、(Z)-嘧草醚、阿特拉通、胺苯磺隆、胺唑草酮、稗草胺、稗草畏、苯草醚、苯草酮、苯達松、苯磺隆、苯嗪草酮、苯噻草胺、苯酮唑、苯氧乙酸、吡草胺、吡草酮、吡氟草胺、吡氟甲禾靈、吡氟氯禾靈、吡嘧磺隆、吡唑草胺、吡唑解草酯、吡唑特、芐草丹、芐草隆、芐草唑、芐磺隆、丙苯磺隆、丙草胺、草不隆、草達津、草凈津、除草丹、除草定、除草醚、噠草特、達草止代謝產物、得殺草、敵稗、敵草胺、敵草凈、敵草隆、敵樂胺、地樂胺、地散磷、疊氮凈、丁草胺、丁草特、丁嗪草酮、啶嘧磺隆、毒草安、毒莠定、惡草靈、惡唑隆、二丙烯草胺、二甲吩草胺、二甲戊靈、二氯苯甲酰胺、二氯吡啶酸、二氯喹啉酸、非草隆、砜嘧磺隆、呋草酮、呋嘧醇、伏草隆、氟胺磺隆、氟吡甲禾靈、氟丙嘧草酯、氟草敏、氟草煙、氟草煙異辛酯、氟噠嗪草酯、氟丁酰草胺、氟啶酮、氟咯草酮、氟禾靈、氟磺胺草醚、氟樂靈、氟硫草定、氟氯氫菊脂、氟噻草胺、氟烯草酸、禾草敵、禾草靈、禾草畏、環丙津、環丙嘧磺隆、環草隆、環草特、環庚草醚、環磺酮、環嗪酮、環莠隆、磺草胺唑、磺草靈、磺草酮、磺樂靈、磺噻隆、磺酰草吡唑、甲磺胺磺隆、甲磺隆、甲基苯噻隆、甲基碘磺隆鈉鹽、甲基氟嘧磺隆、甲基咪草煙、甲羧除草醚、甲酰胺磺隆、甲氧丙凈、甲氧隆、甲氧咪草煙、甲氧醚隆、解草酮、解毒喹、精吡氟禾草靈、精惡唑禾草靈、精喹禾靈、卡草胺、克草猛、枯草隆、喹草酸、喹禾糖酯、利谷隆、亮氨酸、另丁津、隆草特、綠谷隆、綠麥隆、氯苯胺靈、氯吡嘧磺隆、氯草敏、氯氟草醚乙酯、氯磺隆、氯嘧磺隆、氯酯磺草胺、麥草伏甲酯、麥草伏異丙酯、麥草畏、咪草酸、咪草煙、咪唑磺隆、咪唑煙酸、咪唑乙煙酸、醚苯磺隆、醚黃隆、嘧苯胺磺隆、滅草喹、滅草隆、滅藻醌、牧草胺、萘丙胺、脲嘧啶、哌草磷、撲草凈、撲滅津、撲滅通、嗪草酸甲酯、氰氟草酯、炔草酯、乳氟禾草靈、噻草定、噻吩草胺、噻氟隆、噻磺隆、噻酮磺隆、賽克津、三氟羧草醚、殺草胺、殺草丹、雙苯惡唑酸、雙苯酰草胺、雙氟磺草胺、特草定、特草克、特丁凈、特丁噻草隆、特丁通、甜菜安、甜菜寧、肟草酮、戊炔草胺、戊酰苯草胺、西草凈、西瑪津、西瑪通、烯草酮、烯禾啶、酰嘧磺隆、辛酰溴苯腈、新燕靈、溴苯腈、溴丁酰草胺、溴谷隆、溴殺草敏、煙嘧磺隆、野草枯、野麥畏、乙草胺、乙羧氟草醚、乙氧苯草胺、乙氧氟草醚、乙氧嘧磺隆、異丙草胺、異丙甲草胺、異丙凈、異丙樂靈、異丙隆、異惡草胺、異惡唑草酮、異戊乙凈、抑草磷、抑草生、莠滅凈、莠去津、仲丁通、唑草酮和唑嘧磺草胺；

所述殺蟲劑包括3-酮呋喃丹、3-羥基克百威、S-氰戊菊酯、Z-甲基毒蟲畏、Z-氯氰菊酯、胺丙畏、胺菊酯、巴丹、倍硫磷、倍硫磷砜、倍硫磷亞砜、苯胺磷砜、苯線磷、苯線磷亞砜、苯氧菊酯、苯氧威、吡丙醚、吡蟲啉、吡螨胺、吡蚜酮、吡唑硫磷、避蚊胺、芐呋菊酯、丙蟲磷、丙硫克百威、丙硫特普、丙烯菊酯、丙烯酰胺、丙溴磷、殘殺威、蟲酰肼、除蟲脲、噠嗪硫磷、氘代克百威、敵百蟲、敵敵畏、敵蠅威、地安磷、地蟲硫磷、丁二酸二丁酯、丁基嘧啶磷、丁硫克百威、丁酮砜威、丁酮威、丁烯磷、啶蟲丙醚、毒蟲畏、毒殺芬、毒死蜱、對硫磷、對氧磷、多殺菌素、惡蟲酮、惡蟲威、惡唑磷、二甲基二硫醚、二嗪農、發硫磷、伐滅磷、酚線磷、豐索磷、砜吸磷、砜吸磷亞砜、呋蟲胺、呋喃蟲酰肼、呋線威、伏殺磷、氟胺氰菊酯、氟苯嘧啶醇、氟蟲腈、氟蟲脲、氟環脲、氟鈴脲、氟氯苯菊酯、氟乙酰胺、氟蟻腙、高效氯氰菊酯、庚烯磷、谷硫磷、環蟲酰肼、磺吸磷、混滅威、加普胺、甲胺磷、甲拌磷、甲丙硫磷、甲基吡啶磷、甲基毒死蜱、甲基對硫磷、甲基對氧磷、甲基嘧啶磷、甲硫威、甲硫威砜、甲氯磷、甲萘威、甲氰菊酯、甲氧蟲酰肼、久效磷、久效威、抗蚜威、克百威、克敵菊酯、克來范、喹硫磷、樂果、聯苯菊酯、莨菪堿、鄰苯二甲酸丁芐酯、鄰苯二甲二丁酯、鄰苯二甲酸二環己酯、磷酸三苯酯、硫環磷、硫磷嗪、硫雙威、氯氟氰菊酯、氯甲亞胺硫磷、氯菊酯、氯氰菊酯、氯烯炔菊酯、氯辛硫磷、氯唑磷、馬拉代氧氣磷、馬拉松、猛殺威、醚菊酯、嘧啶磷、滅多威、滅害威、滅克磷、滅蚜磷、滅蠅胺、內吸磷、內吸硫磷、氰戊菊酯、炔丙菊酯、噻蟲啉、噻蟲嗪、噻嗪酮、噻唑磷、賽硫磷、三氟氯氰菊酯、三硫磷、三溴磷、三唑磷、殺蟲丹砜、殺蟲磺、殺蟲脒、殺蟲畏、殺撲磷、殺線威、莎稗磷、生物芐呋菊酯、生物丙烯菊酯、雙硫磷、水胺硫磷、順式氯氰菊酯、四氟氯甲醚、四氟醚菊酯、四氯苯醌、速滅磷、速滅威、特丁磷砜、特丁硫磷、涕滅威、涕滅威砜、五氯苯甲腈、西拉硫磷、烯啶蟲胺、辛硫磷、溴氰菊酯、蚜滅多、蚜滅磷亞砜、亞胺硫磷、氧化樂果、氧環唑、氧異柳磷、乙基谷硫磷、乙基溴硫磷、乙基異柳磷、乙硫苯威、乙硫磷、乙霉威、乙酰甲胺磷、乙氧嘧啶磷、異丙威、異惡隆、抑食肼、茚蟲威、蠅毒磷、右旋苯醚菊酯、魚藤酮、育畜磷、治螟磷、仲丁威、茲克威和唑蟲酰胺；

所述殺菌包括(E)-苯氧菌胺、(Z)-苯氧菌胺、百克敏、苯菌靈、苯醚甲環唑、苯噻菌胺、苯霜靈、苯酰菌胺、苯銹啶、比芬諾、吡嘧磷、卞氯三唑醇、丙環唑、丙硫菌唑、丙森鋅、赤霉素、春雷霉素、代森聯、代森錳鋅、代森銀鋅、稻瘟靈、丁苯嗎啉、啶氧菌酯、多菌靈、噁唑菌酮、惡霜靈、二甲嘧酚、粉唑醇、呋氨丙靈、呋菌胺、呋酰胺、氟苯尼考、氟吡菌酰胺、氟啶胺、氟硅唑、氟環唑、氟菌唑、氟喹唑、氟醚唑、氟酰胺、福美雙、腐霉利、咯喹酮、硅氟唑、環丙嘧啶醇、環丙唑醇、磺嘧菌靈、己唑醇、甲基立枯磷、甲基硫菌靈、甲霜靈、腈苯唑、腈菌唑、精甲霜靈、井岡霉素、菌核凈、糠菌唑、克菌丹、克瘟散、喹氧靈、聯氨惡唑酮、聯苯三唑醇、鄰苯基苯酚、鄰碘酰苯胺、硫菌靈、六氯代苯、螺環菌胺、氯苯嘧啶醇、氯硝胺、麥穗寧、咪鮮胺、咪鮮胺錳鹽、咪唑菌酮、咪唑嗪、嘧菌胺、嘧菌環胺、嘧菌酯、嘧霉胺、滅菌丹、滅菌磷、滅菌唑、滅銹胺、氰菌胺、噻苯咪唑、噻苯咪唑-5-羥基、噻枯唑、噻唑菌胺、三苯基氫氧化錫、三環唑、三唑醇、三唑酮、十二環嗎啉、十三嗎啉、雙炔酰菌胺、霜霉滅、霜霉威、霜脲氰、土菌靈、萎銹靈、肟菌酯、戊菌隆、戊菌唑、戊唑醇、烯酰嗎啉、烯唑醇、新燕靈、亞胺唑、氧化萎銹靈、葉菌唑、乙呋草黃、乙環唑、乙嘧酚、異稻瘟凈、異菌脲、抑霉唑、酯菌胺、種菌唑和唑嘧菌胺；

所述殺螨劑包括阿維菌素、苯螨特、蟲螨腈、噠螨靈、丁氟螨酯、丁醚脲、啶蟲脒、氟啶脲、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、焦磷酸四乙酯、可尼丁、克螨特、喹螨醚、聯苯肼酯、螺螨酯、嘧螨醚、噻螨酮、三氯殺螨醇、三氯殺螨砜、三唑錫、殺鈴脲、殺螟丹、虱螨脲、雙甲脒、霜螨靈、四螨嗪、溴螨酯和唑螨酯；

所述殺鼠劑包括氟乙酸、殺鼠靈、殺鼠醚、溴敵隆、溴鼠靈和溴鼠隆；

所述殺線蟲劑包括1,2-二溴乙烷、阿苯達唑、硫線磷和棉隆；

所述植物生長調節劑包括3-吲哚丙酸、3-吲哚丁酸、3-吲哚乙酸、6-芐氨基嘌呤、矮壯素、胺鮮酯、丁酰肼、多效唑、激動素、甲哌翁、抗倒胺、抗倒酯、氯吡脲、萘乙酸、萘乙酰胺、青鮮素、賽苯隆、三丁氯芐膦、縮節胺、甜菜堿、脫落酸、脫葉磷、烯效唑、乙烯利、異惡草松、抑芽唑、玉米素和植酸。