[發(fā)明專利]基于光響應(yīng)聚合的超小氧化鐵納米探針及其制備和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810726038.5
• 申請日: 2018-07-04
• 公開（公告）號: CN108635595B
• 公開（公告）日: 2019-11-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 史向陽;李鑫;陸詩怡;馬丹;彭琛;熊祚剛;婁文奇
• 申請（專利權(quán)）人: 東華大學(xué);上海市第十人民醫(yī)院
• 主分類號: A61K49/12
• 分類號: A61K49/12;A61K49/10;A61K49/18
• 代理公司: 上海泰能知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 31233
• 代理人: 黃志達;魏峯

1.一種基于光響應(yīng)聚合的超小氧化鐵納米探針，其特征在于，該納米探針由表面修飾了3-甲基-3H-雙吖丙啶-3-丙酸和葉酸化聚乙二醇混合物NH₂-PEG-(DA)-FA的超小氧化鐵納米顆粒組成，其中NH₂-PEG-(DA)-FA和超小氧化鐵納米顆粒的質(zhì)量比為7-8:56-60；

所述納米探針的制備方法包括：

(1)將無水氯化鐵溶解在二甘醇中，超聲震蕩，加入二水合檸檬酸鈉，加熱至80℃攪拌至溶液澄清，加入無水醋酸鈉，繼續(xù)攪拌至溶液澄清，200℃溶劑熱反應(yīng)5.5h，冷卻，離心，回溶，烘干，得到表面富含羧基的超小四氧化三鐵納米顆粒Fe₃O₄-COOH NPs，其中無水氯化鐵、二甘醇、二水合檸檬酸鈉和無水醋酸鈉的比例為4mmol:40mL:1.6mmol:12mmol；

(2)在氮氣保護下0℃將乙酰丙酸加入氨甲醇溶液中，攪拌3h，加入羥胺磺酸甲醇溶液，室溫攪拌過夜，提純，將提純得到的液體溶解于無水甲醇中，0℃下依次加入三乙胺和碘甲醇溶液，攪拌反應(yīng)直至深褐色后，繼續(xù)攪拌10min，稀釋，沖洗，干燥，純化，得到3-甲基-3H-雙吖丙啶-3-丙酸DA，其中乙酰丙酸、氨甲醇溶液、羥胺磺酸甲醇溶液、三乙胺和碘甲醇溶液的比例為2.0g:25mL:3.2g:4.3mL:2.1g，氨甲醇溶液的當(dāng)量濃度為7N；

(3)將步驟(2)中DA溶于二氯甲烷中，0℃下加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽EDC和N-羥基琥珀酰亞胺NHS，然后室溫活化2h活化，稀釋，沖洗，干燥，純化，得到活化的NHS-DA，其中DA、EDC和NHS的質(zhì)量比為0.35:0.57:0.34；

(4)將步驟(3)中活化的NHS-DA、氨基端聚乙二醇NH₂-PEG-NHBOC與活化的葉酸NHS-FA分別溶解在二甲基亞砜中，避光混合攪拌3d，加入稀鹽酸，繼續(xù)避光攪拌反應(yīng)2h，透析凍干，得到DA和FA修飾的聚乙二醇混合物NH₂-PEG-(DA)-FA，其中NHS-DA、NH₂-PEG-NHBOC、NHS-FA和稀鹽酸的比例為5.6g:50g:13.7g:50mL，稀鹽酸濃度為2-4M；

(5)將步驟(1)中Fe₃O₄-COOH NPs、步驟(4)中NH₂-PEG-(DA)-FA分別溶于DMSO中，得到Fe₃O₄-COOH NPs溶液和NH₂-PEG-(DA)-FA溶液，將Fe₃O₄-COOH NPs溶液加入EDC溶液避光混合攪拌30min，之后加入NHS溶液，繼續(xù)避光攪拌反應(yīng)3h，加入NH₂-PEG-(DA)-FA溶液避光攪拌反應(yīng)3d，透析凍干，得到超小氧化鐵納米探針Fe₃O₄-PEG-(DA)-FA NPs，其中Fe₃O₄-COOHNPs、NH₂-PEG-(DA)-FA、EDC和NHS的質(zhì)量比為56:7:144:70。