[發(fā)明專利]降解頁巖氣水基鉆屑污染物的微生物復合菌劑及其制備和使用方法

在審

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• 申請日: 2018-07-03
• 公開（公告）號: CN108728387A
• 公開（公告）日: 2018-11-02
• 發(fā)明（設計）人: 張春;王玉建;金吉中;劉雅雪;張思蘭;王朝強;梅緒東;劉璞;何敏;徐烽淋;王丹;熊德明
• 申請（專利權）人: 重慶市涪陵頁巖氣環(huán)保研發(fā)與技術服務中心;中國科學院成都生物研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C02F3/34;C12R1/385;C12R1/01;C12R1/125;C02F103/10
• 代理公司: 重慶華科專利事務所 50123
• 代理人: 夏洪

本發(fā)明涉及一種微生物復合菌劑，特別是用于降解頁巖氣水基鉆屑污染物的微生物復合菌劑及其制備和使用方法。該微生物復合菌劑的微生物主體包括銅綠假單胞菌、不動桿菌、枯草芽孢桿菌和微球菌，銅綠假單胞菌、不動桿菌、枯草芽孢桿菌、微球菌按1～2:0.5～1:1～2:1～2的質量比混合，復合菌劑的活菌數含量為10⁸～10¹² cfu/ml。該微生物復合菌劑能夠對頁巖氣水基鉆屑污染物進行有效降解。

技術領域

本發(fā)明涉及一種微生物復合菌劑，特別是用于降解頁巖氣水基鉆屑污染物的微生物復合菌劑及其制備和使用方法。

背景技術

頁巖氣水基鉆屑是頁巖氣鉆井過程中產生的一種混合地層巖屑與水基鉆井液的一種固體廢物，單井產生量約為800～1000 m³。由于水基鉆屑表面吸附少量的水基鉆井液添加劑，其成分相對復雜，含有一定量的石油烴、鹽分、重金屬等污染物，若對其處理不當，將會對周圍土壤及水體環(huán)境產生一定的影響，因而水基鉆屑無害化處理一直是頁巖氣開發(fā)鉆后治理的重點工作。目前，水基鉆屑無害化處理的主要方法：一是固化填埋，但其占用了大量土地面積且污染物未得以徹底分解，隨著時間的延長，鉆屑固化不均、池體局部沉降，特別是長期降雨對固化池的沖蝕和浸泡作用等，固化體浸出液有可能滲出進而對周邊土壤及水體造成一定的污染。二是建材利用，例如用水基鉆屑制備免燒磚、混凝土、道路墊層等，但建材利用僅是對水基鉆屑污染物暫時實現了固定和封閉，其潛在環(huán)境風險依然存在。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一種降解頁巖氣水基鉆屑污染物的微生物復合菌劑，能夠對頁巖氣水基鉆屑污染物進行有效降解。

本發(fā)明的再一個目的是提供一種降解頁巖氣水基鉆屑污染物的微生物復合菌劑的制備方法。

本發(fā)明的另一個目的是提供一種用微生物復合菌劑降解頁巖氣水基鉆屑污染物的使用方法。

本發(fā)明所述降解頁巖氣水基鉆屑污染物的微生物復合菌劑，該微生物復合菌劑的微生物主體包括銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、不動桿菌（Acinetobacter）、枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）、微球菌（Micrococcaceae），銅綠假單胞菌、不動桿菌、枯草芽孢桿菌、微球菌按1～2:0.5～1:1～2:1～2的質量比混合，復合菌劑的活菌數含量為10⁸～10¹² cfu/ml。

所述微生物復合菌劑為液態(tài)微生物復合菌劑或固態(tài)微生物復合菌劑。

制備降解頁巖氣水基鉆屑污染物的液態(tài)微生物復合菌劑的方法，是將銅綠假單胞菌、不動桿菌、枯草芽孢桿菌、微球菌分別經試管斜面培養(yǎng)、接種搖瓶活化、種子罐一代培養(yǎng)，將種子罐培養(yǎng)的一代菌懸液按發(fā)酵罐培養(yǎng)基體積5～10%的接種量接入發(fā)酵罐液體培養(yǎng)，所述一代菌懸液中，銅綠假單胞菌、不動桿菌、枯草芽孢桿菌、微球菌按1～2:0.5～1:1～2:1～2的質量比接種，培養(yǎng)溫度為25～35℃，培養(yǎng)時間為24～72小時，當復合菌劑的活菌數含量達到10⁸～10¹² cfu/ml時，制得降解頁巖氣水基鉆屑污染物的液態(tài)微生物復合菌劑。

制備降解頁巖氣水基鉆屑污染物的固態(tài)微生物復合菌劑的方法，是將銅綠假單胞菌、不動桿菌、枯草芽孢桿菌、微球菌分別經試管斜面培養(yǎng)、接種搖瓶活化、種子罐一代培養(yǎng)，將種子罐培養(yǎng)的一代菌懸液按發(fā)酵罐培養(yǎng)基體積5～10%的接種量接入發(fā)酵罐液體培養(yǎng)，所述一代菌懸液中，銅綠假單胞菌、不動桿菌、枯草芽孢桿菌、微球菌按1～2:0.5～1:1～2:1～2的質量比接種，培養(yǎng)溫度為25～35℃，培養(yǎng)時間為24～72小時，當復合菌劑的活菌數含量達到10⁸～10¹² cfu/ml時，將發(fā)酵后的液態(tài)微生物復合菌劑按高溫滅菌后的固定化載體質量的10～30%接入，攪拌均勻，在25～35℃條件下烘干培養(yǎng)24～48小時，制得降解頁巖氣水基鉆屑污染物的固態(tài)微生物復合菌劑。