[發明專利]Echinulin的制備方法

有效

• 申請號: 201810718239.0
• 申請日: 2018-07-02
• 公開（公告）號: CN108586435B
• 公開（公告）日: 2020-09-29
• 發明（設計）人: 周韓玲;李國友;廖勤儉;吳林蔚;趙東;安明哲;喬宗偉;李楊華;王小琴;郭艷;宋廷富
• 申請（專利權）人: 宜賓五糧液股份有限公司;中國科學院成都生物研究所
• 主分類號: C07D403/06
• 分類號: C07D403/06
• 代理公司: 成都虹橋專利事務所(普通合伙) 51124
• 代理人: 梁鑫

本發明涉及Echinulin的制備方法，屬于化學分析技術領域。本發明所要解決的是現有的Echinulin制備方法原料不易得到、制備工藝復雜的問題，解決上述問題的技術方案是提供了Echinulin的制備方法：從大曲中分離得到，該方法包括如下步驟：a、取大曲，粉碎，有機溶劑提取，濃縮，得到大曲浸膏；b、將大曲浸膏進行硅膠正相柱層析，收集含有Echinulin的洗脫液，濃縮，得到粗品；c、將粗品進行葡聚糖凝膠柱層析，收集含有Echinulin的洗脫液，濃縮，即得Echinulin。本發明將多種層析技術相結合，首次從大曲中分離制備出Echinulin，產品純度高。

技術領域

本發明涉及Echinulin的制備方法，屬于化學分析技術領域。

背景技術

Echinulin，即3S,6S,3-[[2-(1,1-二甲基-2-丙烯)-5,7-二(3,3-二甲基丙烯基)-1H-吲哚-3-基]甲基]-6-甲基-2,5-哌嗪二酮，CAS NO：1859-87-6，分子量：461.64，是一種環二肽類化合物，其化學結構如下：

既往的研究表明，Echinulin具有廣泛的生理活性，如抗病毒、抗結核、抗氧化、抗炎癥、增強免疫、降血壓等等。目前，該化合物主要由單一菌種，如Aspergilluschevalieri，Eurotium cristatum，Aspergillus veriecolor等，通過純菌種培養，從發酵產物中分離提取得到，存在單菌純菌種培養條件苛刻、發酵產物中結構類似物多、純化工序繁多、分離純化難度較大等缺點。因此，開發原料易得、工藝簡單的Echinulin的制備方法，具有重要意義。

大曲是用來釀酒的一種原料，是以小麥等為原料，經過粉碎，加水混捏，壓成曲醅，讓自然界各種微生物在上面生長而制成的，不需要進行單一菌種純化、培養等復雜操作。在大曲的制作過程中，復雜的微生物群體利用其產生的各種酶系，對原料中的蛋白質、氨基酸等進行代謝，生成小分子肽類化合物(以酰胺鍵形成的一類化合物)。蒸餾白酒時，來自于大曲中的小分子肽類化合物在共沸、夾帶等作用下可能會被帶入到酒體之中，使得白酒產品具有一定的保健功效。分離大曲中具有生理活性的小分子肽類化合物，可為進一步探索白酒中健康功能因子奠定基礎，為闡明“適度飲酒有利于健康”這一觀點提供理論依據，對白酒產品的市場推廣有著重要的意義。

發明內容

本發明的目的在于提供Echinulin的制備方法，以解決現有的Echinulin制備方法原料不易得到、制備工藝復雜等問題。

本發明提供了Echinulin的制備方法：從大曲中分離得到。

進一步地，所述的制備方法包括如下步驟：

a、取大曲，粉碎，有機溶劑提取，濃縮，得到大曲浸膏；

b、將大曲浸膏進行硅膠正相柱層析，收集含有Echinulin的洗脫液，濃縮，得到粗品；

c、將粗品進行葡聚糖凝膠柱層析，收集含有Echinulin的洗脫液，濃縮，即得Echinulin。

本發明首先選用有機溶劑將大曲中的微量目標物質提取出來，同時要避免淀粉、糖類、蛋白質等大曲的主要成分進入到提取液中。

然后，采用硅膠正相柱層析，其原理是根據化合物的極性不同進行分離，從而達到分離純化Echinulin的目的。

采用葡聚糖凝膠柱層析，其原理是根據化合物的分子量大小不同進行分離，分子量大的化合物先流出，分子量小的化合物后流出。

要想從成分復雜的大曲中分離出高純度的Echinulin，必須將上述分離手段結合起來，以上a、b、c三個步驟缺一不可。

進一步地，所述有機溶劑為醇系溶劑或乙酸乙酯。

優選地，所述醇系溶劑為甲醇。