[發明專利]集成式免疫層析試紙、其制備方法及應用在審
| 申請號： | 201810718002.2 | 申請日： | 2018-07-03 |
| 公開（公告）號： | CN110672853A | 公開（公告）日： | 2020-01-10 |
| 發明（設計）人： | 蔣興宇;鄧瑾琦 | 申請（專利權）人： | 國家納米科學中心 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68;G01N33/558;G01N33/543 |
| 代理公司： | 11521 北京市英智偉誠知識產權代理事務所(普通合伙) | 代理人： | 劉丹妮 |
| 地址： | 100190 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 底物 試紙 層析試紙 固態過氧化物 化學發光信號 過硼酸鈉 混合物 制備方法和應用 化學發光底物 免疫層析試紙 氧化劑 定量分析 玻璃纖維 讀出系統 發光體系 高靈敏度 固相化學 化學發光 集成式 凍干 優選 制備 讀出 避開 儲存 應用 | ||
1.一種集成式免疫層析試紙，其特征在于，所述試紙基于固相化學發光體系，所述試紙包括底物墊和層析試紙；其中所述底物包括固態過氧化物，優選地，所述固態過氧化物為過硼酸鈉。
2.根據權利要求1所述的試紙，其特征在于，所述底物還包括魯米諾和對碘苯酚。
3.根據權利要求1或2所述的試紙的制備方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
(1)制備底物墊：配制底物混合物，用冷凍干燥方法將底物混合物溶液負載在玻璃纖維上；凍干之后，將負載有底物的玻璃纖維被裁成底物墊貼敷于聚氯乙烯墊板上；
(2)負載抗體：用硝化纖維素膜負載捕獲抗體和第二抗體；
(3)標記抗體和酶：用金納米顆粒標記檢測抗體和辣根過氧化物酶；
(4)制備層析試紙：用冷凍干燥方法將金標抗體負載在玻璃纖維上作為金標抗體墊；凍干之后，將樣品墊、金標抗體墊、硝基纖維素膜和吸水墊貼敷于聚氯乙烯墊板上，并裁成層析試紙；
(5)底物墊與層析試紙集成：將底物墊和層析試紙同時固定于聚碳酸酯定位器具上。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述底物混合物中，魯米諾的濃度為50～200毫摩每升，優選為80～150毫摩每升，最優選為100毫摩每升；
對碘苯酚的濃度為50～200毫摩每升，優選為80～150毫摩每升，最優選為100毫摩每升；
過硼酸鈉的濃度為10～100毫摩每升，優選為30～80毫摩每升，最優選為50毫摩每升。
5.根據權利要求3或4所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，每條底物墊的長度為3～5毫米，優選為4毫米；每條底物墊的寬度為0.5～2毫米，優選為1毫米。
6.根據權利要求3至5中任一項所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，所述抗體濃度為1.5～2毫克每毫升，優選為捕獲抗體1.7毫克每毫升，第二抗體2.0毫克每毫升。
7.根據權利要求3至6中任一項所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中：
所述金納米顆粒的粒徑為30～80納米，優選為50～70納米，最優選為60納米；
標記時的抗體濃度為25～100微克每毫升，優選為30～80微克每毫升，最優選為50微克每毫升；和/或
抗體和酶的摩爾比為1：10～20，優選為1:20。
8.根據權利要求3至7中任一項所述的方法，其特征在于，所述步驟(4)中，每條層析試紙的寬度為3～5毫米，優選為4毫米。
9.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：
權利要求1或2所述的集成式免疫層析試紙。
10.根據權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒進一步包括：
鋁箔袋以及密封在所述鋁箔袋中的干燥劑，和/或滴管。
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