[發明專利]碎頭面中蟲卵含量的檢測方法及應用在審
| 申請號： | 201810715767.0 | 申請日： | 2018-06-29 |
| 公開（公告）號： | CN108489920A | 公開（公告）日： | 2018-09-04 |
| 發明（設計）人： | 孫君庚;郭媛媛;董金龍;陰志剛 | 申請（專利權）人： | 想念食品股份有限公司 |
| 主分類號： | G01N21/31 | 分類號： | G01N21/31;G01N21/78 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 宋南 |
| 地址： | 473000 河*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 蟲卵 檢測 顯色溶液 純化液 富集液 酶解液 蒸餾水 二甲氨基苯甲醛 蟲卵檢測 固液分離 回收利用 幾丁質酶 顯色反應 吸光度 碎頭 浸泡 應用 緩解 | ||
1.一種碎頭面中蟲卵含量的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：
(a)將碎頭面浸泡于蒸餾水中，固液分離，得到蟲卵富集液：
(b)將蟲卵富集液進行收集和純化，得到蟲卵純化液；
(c)將幾丁質酶加入蟲卵純化液中，得到蟲卵酶解液；
(d)將二甲氨基苯甲醛加入蟲卵酶解液中進行顯色反應，得到顯色溶液，測定顯色溶液的吸光度，得到碎頭面中蟲卵含量。
2.根據權利要求1所述的碎頭面中蟲卵含量的檢測方法，其特征在于，在步驟(a)中，碎頭面與蒸餾水的液料比為(10-20):1；
優選地，浸泡時間為3-5h；
優選地，蒸餾水為0-5℃的蒸餾水；
優選地，先通過靜置取上清液進行一次固液分離，再通過離心將上清液進行二次固液分離，得到蟲卵富集液。
3.根據權利要求1所述的碎頭面中蟲卵含量的檢測方法，其特征在于，在步驟(b)中，采用密度梯度離心法進行蟲卵富集液的收集和純化；
優選地，采用percoll溶液或Focill溶液作為密度梯度離心法的分層溶液；
優選地，采用聚蔗糖作為密度梯度離心法的分離液。
4.根據權利要求1所述的碎頭面中蟲卵含量的檢測方法，其特征在于，還包括步驟(p)，步驟(p)設置于步驟(b)和步驟(c)之間，步驟(p)為將蟲卵純化液進行破碎；
優選地，采用超聲裂解或液氮研磨進行蟲卵純化液的破碎。
5.根據權利要求1所述的碎頭面中蟲卵含量的檢測方法，其特征在于，在步驟(c)中，先將幾丁質酶加入蟲卵純化液中，再加入鹽酸，調節pH值為3，固液分離，得到蟲卵酶解液；
優選地，采用離心進行固液分離；
優選地，離心速度為2500-3500r/min，離心時間為3-8min；
進一步優選地，離心速度為3000r/min，離心時間為5min。
6.根據權利要求1所述的碎頭面中蟲卵含量的檢測方法，其特征在于，在步驟(d)中，先在蟲卵酶解液中加入碳酸鈉溶液混合均勻，置于沸水浴加熱后，冷卻，再加入冰醋酸溶液混合均勻，然后加入二甲氨基苯甲醛試劑混合均勻，最后加入乙酸，進行顯色反應；
優選地，在沸水浴中加熱的時間為3-8min，優選為5min。
7.根據權利要求1所述的碎頭面中蟲卵含量的檢測方法，其特征在于，還包括步驟(s),步驟(s)設置于步驟(a)之前，步驟(s)為繪制蟲卵濃度與吸光度的標準曲線。
8.根據權利要求1所述的碎頭面中蟲卵含量的檢測方法，其特征在于，在步驟(b)中，先將蟲卵富集液透析后，再進行收集和純化。
9.根據權利要求8所述的碎頭面中蟲卵含量的檢測方法，其特征在于，采用截留分子量為8000-10000的透析袋進行透析。
10.根據權利要求1-9任一項所述的碎頭面中蟲卵含量的檢測方法在碎頭面回收利用中的應用。
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