[發(fā)明專利]測定脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2的免疫層析檢測試劑盒及其制備方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810708123.9 | 申請日: | 2018-07-02 |
| 公開(公告)號: | CN109001449A | 公開(公告)日: | 2018-12-14 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 王鵬浩;宋璐琳;王文亮;劉衍亮;陳萍萍;孫寧寧 | 申請(專利權(quán))人: | 威海紐普生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/533 | 分類號: | G01N33/533 |
| 代理公司: | 威海科星專利事務(wù)所 37202 | 代理人: | 初姣姣 |
| 地址: | 264200 山東省威海市高區(qū)*** | 國省代碼: | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 硝酸纖維素膜 試劑墊 試劑盒 包被 免疫層析試紙條 底板 免疫層析檢測 單克隆抗體 彩色熒光 磷脂酶 吸收墊 樣品墊 脂蛋白 鼠抗 微球 熒光免疫分析儀 多克隆抗體 檢測靈敏度 定量結(jié)果 定性測定 定性結(jié)果 交錯固定 山羊抗鼠 塑料外殼 靈敏度 檢測線 試紙條 質(zhì)控線 分界線 制備 定性 場景 檢驗 | ||
1.一種測定脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2的免疫層析檢測試劑盒,由免疫層析試紙條和塑料外殼組成,所述免疫層析試紙條是由底板、樣品墊、試劑墊、硝酸纖維素膜和吸收墊組成,所述樣品墊、試劑墊、硝酸纖維素膜和吸收墊依次交錯固定于所述底板上,其特征在于所述試劑墊包被有鼠抗人Lp-PLA2單克隆抗體標(biāo)記的彩色熒光微球,硝酸纖維素膜上的檢測線包被有鼠抗人Lp-PLA2單克隆抗體,質(zhì)控線包被有山羊抗鼠多克隆抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種一種測定脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2的免疫層析檢測試劑盒,其特征在于所述試劑墊的彩色熒光微球的直徑范圍是180-200nm;所述彩色熒光微球摻雜有稀土鑭系元素,為銪(Eu)、釤(Sm)、鉺(Er)、釹(Nd)中的任意一種或幾種的混合物;所述彩色熒光微球摻雜的彩色染料含有氨基或者羥基官能團(tuán),為酸性紫1、酸性紫7、酸性藍(lán)25、分散紅58中的任意一種或幾種的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測定脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2的免疫層析檢測試劑盒,其特征在于所述試劑墊上彩色微球標(biāo)記的抗體來源于針對2個不同抗原表位的單克隆抗體細(xì)胞株,所述硝酸纖維素膜上的檢測線包被的抗體來源于針對2個不同抗原表位的單克隆抗體細(xì)胞株。
4.一種如權(quán)利要求1-3中任意一項所述的測定脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2的免疫層析檢測試劑盒的制備方法,其特征在于4個針對不同抗原表位的細(xì)胞株采用如下步驟制得:
步驟1:單克隆抗體細(xì)胞株的獲得:用Lp-PLA2蛋白免疫小鼠,采用標(biāo)準(zhǔn)的單克隆抗體制備方法制備特異性高親和力的單克隆抗體細(xì)胞株,對所獲得的單抗細(xì)胞株制備的抗體兩兩配對進(jìn)行配對篩選,根據(jù)配對結(jié)果優(yōu)選出用于試劑盒的4株單抗細(xì)胞株,其中2株用于檢測,兩株用于捕獲;
步驟2:調(diào)整4株單抗細(xì)胞株制備的單克隆抗體的比例,優(yōu)選出用于最終試劑盒制備的單抗混合物的比例;
步驟3:單克隆抗體的大量制備:采用標(biāo)準(zhǔn)的腹水生產(chǎn)工藝制備并純化Lp-PLA2單克隆抗體,分裝后保存于-20℃?zhèn)溆谩?/p>
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