[發明專利]一種小分子血紅素肽及其制備方法

在審

• 申請號: 201810707808.1
• 申請日: 2018-07-02
• 公開（公告）號: CN108753895A
• 公開（公告）日: 2018-11-06
• 發明（設計）人: 靳國鋒;馬素敏;何立超;金永國;馬美湖;任景樂
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/30
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 劉奇

本發明涉及一種小分子血紅素肽及其制備方法，屬于補鐵活性物質制備技術領域。本發明提供的小分子血紅素肽由包括以下步驟的方法制備得到：將血紅蛋白與蛋白復合酶混合進行酶解反應；所述酶解反應的條件為在pH值為7～9的條件下，40～60℃酶解1～5h；所述蛋白復合酶包括堿性蛋白酶和中性蛋白酶。本發明提供的小分子血紅素肽中血紅素的提取率高、純度高，且所述血紅素肽補鐵活性高。

技術領域

本發明涉及補鐵活性物質制備技術領域，具體涉及一種小分子血紅素肽及其制備方法。

背景技術

畜禽動物血液作為屠宰場加工的副產物之一，其高值化利用一直是研究的熱點。血紅蛋白作為動物血液中含量最豐富的蛋白質，加強其綜合運用對提高豬血附加值具有非常重要的意義。血紅素是典型的卟啉類化合物，是由四個吡咯連接構成的卟啉環中心鑲嵌一個鐵離子形成的化合物，其相對分子質量約為616.5。對動物血液中血紅素的開發利用是動物血液深加工利用的重要方向。

血紅素鐵在食品工業上被廣泛的用作補鐵劑，主要有三種形式：血紅素肽、氯化血紅素以及血紅蛋白，用于治療和緩解缺鐵性貧血。除了在食品工業上的運用，血紅素鐵在藥物領域也是制備抗腫瘤藥物-血卟啉的前體物質。

目前來說，血紅素肽的制備在食品工業上又叫做血液的脫色處理，制備血紅素肽的方法分為三大類，第一類是化學法，如酸性丙酮法和冰醋酸法。第二類是物理法，如沉淀法和吸附法。第三類是生物法，如酶法。酸性丙酮法等化學法雖然提取率好，產物純度高，但是殘留的有機試劑會成為食品中風險成分。CMC-Na等吸附法適用于醫藥工業中制備成片劑，但血紅素肽后期的分離純化較難實現。相較于其他脫色方法，酶法是目前為止制備血紅素肽最環保的工藝方法，產物具有更好溶解性和最小有害殘留物風險。

蛋白酶如胃蛋白酶、堿性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶都有研究用來制備血紅素肽，酶解類型又可以分為：單一酶解、復合酶解、分步酶解。同時酶解也可以與物理前處理方式相結合，如超聲酶解、微波酶解、高壓酶解等，這些酶解產物中都是含有適量的血紅素肽。目前通過酶解制備血紅素肽多存在酶解時間長、產物得率低，酶解工藝復雜等問題，因此如何簡化酶解工藝，提高血紅素得率，縮短酶解時間也一直是需要解決的問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種小分子血紅素肽及其制備方法。本發明提供的小分子血紅素肽中血紅素的提取率高、純度高，且所述血紅素肽補鐵活性高。

本發明提供了一種小分子血紅素肽，由包括以下步驟的方法制備得到：

將血紅蛋白與復合蛋白酶混合進行酶解反應；所述酶解反應的條件為在pH值為7～9的條件下，40～60℃酶解1～5h；所述復合酶包括堿性蛋白酶和中性蛋白酶。

優選的是，所述血紅素肽的分子量為3.4～14.4kDa。

優選的是，所述蛋白復合酶相對于血紅蛋白的用量為6000～10000U/g。

優選的是，所述蛋白復合酶中堿性蛋白酶和中性蛋白酶的酶添加量比為(7～3)：(3～7)。

優選的是，酶解反應完成后，采用酸沉淀法對得到的酶解反應液進行純化。

本發明還提供了上述技術方案所述血紅素肽的制備方法，包括以下步驟：

將血紅蛋白與蛋白復合酶混合進行酶解反應，所述酶解反應條件為在pH值為7～9的條件下，40～60℃酶解1～5h；所述蛋白復合酶包括堿性蛋白酶和中性蛋白酶。

優選的是，所述蛋白復合酶相對于血紅蛋白的用量為6000～10000U/g。

優選的是，所述蛋白復合酶中堿性蛋白酶和中性蛋白酶的酶添加量比為(7～3)：(3～7)。

優選的是，酶解反應完成后，采用酸沉淀法對得到的酶解反應液進行純化。