[發明專利]一種檢測β-CTx的試劑盒及使用方法

在審

• 申請號: 201810699145.3
• 申請日: 2018-06-29
• 公開（公告）號: CN109061177A
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發明（設計）人: 韓霜;白仲虎;張俊蘭
• 申請（專利權）人: 江南大學;江蘇拜明生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/543;G01N21/76
• 代理公司: 無錫盛陽專利商標事務所(普通合伙) 32227
• 代理人: 顧吉云;郭金玉

本發明提供了一種檢測β?CTx的試劑盒，其檢測靈敏度高、可靠性好。一種檢測β?CTx的試劑盒，其特征在于：包括校準品、質控品、生物素標記的β?CTx抗體的溶液、辣根過氧化物酶標記的β?CTx抗體的溶液、鏈霉親、素標記的納米磁微粒懸浮液和底物溶液；校準品包括濃度為0 pg/mL、50 pg/mL、200 pg/mL、600 pg/mL、2000 pg/mL、6000 pg/mL的β?CTx抗原溶液；生物素標記的β?CTx抗體的溶液濃度為0.5μg/ml；辣根過氧化物酶標記的β?CTx抗體的濃度為1.5μg/ml；鏈霉親和素標記的納米磁微粒懸浮液的濃度為0.5mg/ml。

技術領域

本發明屬于醫療器械生物類免疫體外診斷領域，具體涉及一種檢測β-CTx的試劑盒及使用方法。

背景技術

骨質疏松癥是一種靜態疾病：發生骨折前的一些非特異性癥狀常常被忽視:如腰背痛。大多數病例是在骨折后被診斷的 ，相關的并發癥大多為骨折，這一點極大地提高了醫療費用。早期診斷能夠幫助減少醫療經費。越來越多的醫院科室開設了骨質疏松檢測，例如：內分泌科、骨科、婦產科、中醫科等，并逐漸開始重視收治骨質疏松病人。目前我國的各級醫院主要以骨密度作為輔助診斷標準，尚未全面使用骨代謝標志物指標。

骨代謝標志物之一的β-CTx，是I型膠原蛋白中I鏈的620-633氨基酸位置中的8個氨基酸(Glμ-Lys-Ala-His-βAsp-Gly-Gly-Arg)。在骨成熟過程中，I鏈的620-633氨基酸位置中的8個氨基酸的 C端肽的α-天冬氨酸轉變成β型天冬氨酸（β-CTx），此類羧基端的異構肽是I型膠原降解的主要特異性產物。血清β-CTx水平的增高表明患者的骨吸收程度增加，骨吸收抑制治療后血清β-CTx水平會恢復正常。

在國內，β-CTx檢測臨床上主要以國外羅氏公司試劑應用為主，國外進口試劑價格非常昂貴，給患者帶來很大的經濟負擔，不利于在基層普及。因此，有待開發一種β-CTx檢測靈敏度高與可靠性好的試劑盒，以降低患者使用成本，并提高推廣使用。

發明內容

針對上述問題，本發明提供了一種檢測β-CTx的試劑盒，其檢測靈敏度高、可靠性好；此外，本發明還提供了該試劑盒檢測骨鈣素的使用方法。

一種檢測β-CTx的試劑盒，其特征在于：包括校準品、質控品、生物素標記的β-CTx抗體的溶液、辣根過氧化物酶標記的β-CTx抗體的溶液、鏈霉親、素標記的納米磁微粒懸浮液和底物溶液；

所述校準品包括濃度為0 pg/mL、50 pg/mL、200 pg/mL、600 pg/mL、2000 pg/mL、6000pg/mL的β-CTx抗原溶液；

所述質控品包括濃度為200 pg/mL、2000 pg/mL的β-CTx抗原溶液；

所述生物素標記的β-CTx抗體的溶液濃度為0.5μg/ml；

所述辣根過氧化物酶標記的β-CTx抗體的濃度為1.5μg/ml；

所述鏈霉親和素標記的納米磁微粒懸浮液的濃度為0.5mg/ml；

所述底物溶液包括溶液A和溶液B，溶液A為含有0.4%魯米諾，pH9.0的水溶液，溶液B為含有0.06%Na₂B₄O₇ ，pH5.0的水溶液。

進一步的，所述校準品、所述質控品均由β-CTx抗原與0.1M、pH值為7.3的Tris-HCl緩沖液配制得到，β-CTx抗原購自眾森源生物技術(江蘇)有限公司，貨號為9001。