[發明專利]一種兼性氮化碳親水性富集材料及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 201810694528.1
• 申請日: 2018-06-29
• 公開（公告）號: CN108854971A
• 公開（公告）日: 2018-11-23
• 發明（設計）人: 應萬濤;錢小紅;井紅宇;張勇
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
• 主分類號: B01J20/22
• 分類號: B01J20/22;B01J20/30;C07K1/22
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;吳愛琴

1.一種兼性氮化碳親水性富集材料，為：L-Cys-Au@M-C₃N₄，其中，L-Cys-Au表示結合金的L-半胱氨酸，M-C₃N₄表示薄層石墨相氮化碳；

所述兼性氮化碳親水性富集材料具有片層結構，片層薄，且分散均勻，表面兼性親水官能團豐富。

2.制備權利要求1所述的兼性氮化碳親水性富集材料的方法，包括：

1)將三聚氰胺固體煅燒后均化處理，得到石墨相氮化碳粉末；

2)將所述石墨相氮化碳粉末分散于水中得到g-C₃N₄分散液，微波反應，離心，收集上層懸浮液，得到水相分散的薄層石墨相氮化碳分散液；

3)向所述薄層石墨相氮化碳分散液中加入金源，充分混合，離心分離收集固體；將所述固體分散至水中，加入還原劑，攪拌下反應，收集固體，得到載金的薄層石墨相氮化碳；

4)將上述載金的薄層石墨相氮化碳分散于有機溶劑中，加入L-半胱氨酸，攪拌下反應，離心分離，收集固體，得到兼性氮化碳親水性材料。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：步驟1)中，所述煅燒的溫度為500-700℃，時間為1-4h，

所述煅燒過程中的升溫速率為1-5℃/min。

4.根據權利要求2或3所述的方法，其特征在于：步驟2)中，所得g-C₃N₄分散液的濃度為1-3mg/mL，g-C₃N₄分散液的總體積不超過300mL；

所述微波反應在95℃溫控微波反應器中進行；

所述微波反應在攪拌條件下進行，具體可在200W磁力攪拌條件下進行；

所述微波反應的時間為8-14h。

所述離心的條件為：1000轉/min離心2min。

5.根據權利要求2-4中任一項所述的方法，其特征在于：步驟3)中，所述金源選自：HAuCl₄；

所述薄層石墨相氮化碳分散液中薄層石墨相氮化碳與金源的配比為：1-4μmol：1g；

所述金源以金源溶液的形式加入；

所述金源為HAuCl₄時，以10-40mM的HAuCl₄溶液的形式加入；

所述還原劑選自：NaBH₄、氨硼烷、水合肼；

所述反應的時間為0.5-2h。

6.根據權利要求2-5中任一項所述的方法，其特征在于：步驟4)中，所述有機溶劑為甲醇；

所述L-半胱氨酸以L-半胱氨酸甲醇乙酸溶液的形式加入；

所述L-半胱氨酸甲醇乙酸溶液中，甲醇與乙酸體積比為6:1；

所述L-半胱氨酸甲醇乙酸溶液中L-半胱氨酸的濃度為20-80mM；

所述載金的薄層石墨相氮化碳與所述L-半胱氨酸甲醇乙酸溶液中L-半胱氨酸的配比為2-8μmol：1g；

所述L-半胱氨酸在攪拌條件下加入；

所述反應的時間為4-6h。

7.權利要求1中所述的兼性氮化碳親水性富集材料在生物樣本中糖肽的選擇性富集與分離中的應用。

8.一種選擇性富集與分離生物樣本中糖肽的方法，包括：

將權利要求1中所述的兼性氮化碳親水性富集材料與肽樣品接觸富集，用沖洗非糖肽的流動相沖洗，離心去除非糖肽，最后用洗脫糖肽的流動相將富集的糖肽洗脫下來，即可。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：

沖洗非糖肽的流動相為水、乙腈和三氟乙酸混合溶液，其中，水：乙腈：三氟乙酸體積比可為：10-30：70-90：0.2；

洗脫糖肽的流動相為0.1％的三氟乙酸溶液；

所述肽樣品的樣品濃度為0.1ng/mL-1mg/mL，富集的溫度為室溫。

10.根據權利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述肽樣品來源包括組織、血液、尿液等生物樣品中的蛋白或者糖蛋白標準品中的一種或多種蛋白混合。