[發明專利]一種金水寶片的指紋圖譜檢測方法

在審

• 申請號: 201810693428.7
• 申請日: 2018-06-29
• 公開（公告）號: CN108693276A
• 公開（公告）日: 2018-10-23
• 發明（設計）人: 易耀江;彭常春;郭夢萍;何平清
• 申請（專利權）人: 江西濟民可信藥業有限公司;江西濟民可信集團有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為;孟旭

1.一種金水寶片指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟

步驟1，供試品溶液的制備：取金水寶片加入甲醇，超聲處理，加甲醇定容濾過，取續濾液至蒸發皿中，蒸發溶劑至干，殘渣用水溶解，定容，濾過，續濾液為供試品溶液；

步驟2，將供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測定，記錄色譜圖；

步驟3，將色譜圖和標準指紋圖譜對照，兩者符合，為合格品；

其中，色譜條件如下：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(柱長為25cm，內徑為4.6mm，粒徑為5μm)；以甲醇為流動相A，以0.02mol/L的磷酸二氫鉀溶液為流動相B，按下表中的規定進行梯度洗脫；檢測波長為260nm。理論板數按腺苷峰計算應不低于5000，其中梯度洗脫流程如下：

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1，供試品溶液的制備取金水寶片20片，除去包衣，精密稱定，研細，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率500W，頻率40kHz)20分鐘，取出，放冷，再稱定重量，加70％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液25ml至蒸發皿中，回收溶劑至干，殘渣用水溶解，定容至25ml容量瓶中，濾過，得續濾液；

步驟2，精密吸取上步所得續濾液l0μl，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，

步驟3，將色譜圖和標準指紋圖譜對照，供試品指紋圖譜中應分別呈現與參照物色譜峰保留時間相同的色譜峰。按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統計算，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜的相似度不得低于0.90。

3.一種指紋圖譜的建立方法，所述方法步驟如下：

步驟1，參照物溶液的制備取尿苷、鳥苷及腺苷對照品適量，精密稱定，加水制成每1ml分別各含25μg的混合溶液，即得。

步驟2，供試品溶液的制備取多批次合格的金水寶片樣品20片，除去包衣，精密稱定，研細，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率500W，頻率40kHz)20分鐘，取出，放冷，再稱定重量，加70％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液25ml至蒸發皿中，回收溶劑至干，殘渣用水溶解，定容至25ml容量瓶中，濾過，取續濾液，即得。

步驟3，分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各l0μl，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖；所得多批次合格樣品的色譜圖經過計算機模擬軟件綜合，得到標準的合格樣品的高效液相色譜圖，即指紋圖譜；

其中，色譜條件如下：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(柱長為25cm，內徑為4.6mm，粒徑為5μm)；以甲醇為流動相A，以0.02mol/L的磷酸二氫鉀溶液為流動相B，按下表中的規定進行梯度洗脫；檢測波長為260nm。理論板數按腺苷峰計算應不低于5000，其中梯度洗脫流程如下：