[發(fā)明專利]郁金指紋圖譜的測定方法及其標準指紋圖譜

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810693396.0
• 申請日: 2018-06-29
• 公開（公告）號: CN108693275B
• 公開（公告）日: 2021-04-02
• 發(fā)明（設計）人: 劉薇薇;甘國峰;於江華;閔江;劉筱瀅;李婷
• 申請（專利權(quán)）人: 無錫濟煜山禾藥業(yè)股份有限公司;江西濟民可信集團有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京華科聯(lián)合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為;孟旭

1.一種郁金指紋圖譜檢測方法，其特征在于，所述方法包括氣相指紋圖譜方法及液相指紋圖譜方法，

其中，氣相指紋圖譜的檢測方法，包括以下步驟：

(1)供試品溶液制備：取郁金藥材1.5g，置1000ml燒瓶中，加水100ml及沸石數(shù)粒，加水使充滿刻度部分并溢入燒瓶中為止.再加入正己烷2ml，連接回流裝置，加熱至沸并保持微沸3小時，放冷，分取正己烷層，置2ml量瓶中，揮發(fā)油提取器用少量正己烷洗滌，洗滌液并入同一量瓶中，加正己烷至刻度，搖勻，加入無水硫酸鈉0.5g，搖勻，取上清液，即得；

(2)對照品溶液的制備：取β-欖香烯對照品加入加正己烷制成濃度已知的溶液，即得所述β-欖香烯對照品濃度為1mg/ml；

(3)測定方法：吸取對照品溶液與供試品溶液注入氣相色譜儀，測定，并記錄色圖譜，用所得色譜圖和標準郁金藥材的氣相指紋圖譜進行對照，符合一致的為合格品；

其中，所述標準郁金藥材的氣相指紋圖譜，制備方法如下：

取多批次經(jīng)其他方法檢測合格的郁金藥材1.5g，每個批次分別用水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油，所得揮發(fā)油加入2ml正己烷混合均勻，得到多批次樣品；吸取所有批次上述樣品注入氣相色譜儀，測定，并記錄色圖譜，用指紋圖譜軟件對所得的圖譜進行處理，獲得郁金氣相標準圖譜；

其中，所述氣相色譜系統(tǒng)條件如下：柱溫為程序升溫：初始溫度為100℃，保持3分鐘，以每分鐘8℃的速率升溫至200℃，保持10分鐘，繼以每分鐘3℃的速率升溫至240℃，保持20分鐘；載氣為氮氣，分流進樣，分流比1:1；所用的氣相毛細管柱的型號為DB-624柱、TraceGOLDTG-624、或OV-1301，柱長為30m，內(nèi)徑為0.25mm，且氮氣流速為1.1ml/min，進樣口溫度為240℃，檢測器溫度為260℃，

其中，液相指紋圖譜的檢測方法，包括以下步驟：

(a)供試品溶液制備：

取5g溫郁金藥材粉末于燒瓶中，加入沸石數(shù)粒并以料液比1g：20mL加入純化水，按揮發(fā)油提取方法，自測定器上端加水使充滿刻度并溢入燒瓶為止，再加入2mL正己烷，連接回流裝置，加熱至沸并保持6小時，冷至室溫后取正己烷層置5mL容量瓶，并用少量正己烷洗滌測定器洗滌液并入同一容量瓶，最后加正己烷定容，

(b)對照品溶液的制備：取莪術二酮對照品，加入無水乙醇制成濃度為0.3mg/ml，即得，

(c)測定方法：分別吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl注入液相色譜儀，記錄色圖譜，用所得色譜圖和標準郁金藥材的液相指紋圖譜進行對照，符合一致的為合格品，

其中液相色譜系統(tǒng)條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，型號為4.6×150mm，5μm，柱溫32℃；以甲醇為流動相A；水為流動相B，按照下表中的規(guī)定進行梯度洗脫；檢測波長為220nm；流速為1.0ml/min，

時間，min	A，％	B，％
0～20	50→56	50→44
20～34	56	44
34～37	56→67	44→33
37～48	67→70	33→30
48～50	70→75	30→25
50～58	75→81	25→19
58～62	81	19
62～68	81→83	19→17
68～72	83→100	17→0
72～80	100	0

其中，所述標準郁金藥材的液相指紋圖譜，制備方法如下：

取多批次經(jīng)其他方法檢測合格的郁金藥材1.5g，每個批次分別用水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油，所得揮發(fā)油加入正己烷混合均勻至刻度，得到多批次樣品；吸取所有批次上述樣品注入液相色譜儀，測定，并記錄色圖譜，用指紋圖譜軟件對所得的圖譜進行處理，獲得郁金液相標準圖譜。