[發明專利]曼氏無針烏賊神經肽Y及其重組表達方法和應用在審
| 申請號: | 201810681630.8 | 申請日: | 2018-06-27 |
| 公開(公告)號: | CN109021085A | 公開(公告)日: | 2018-12-18 |
| 發明(設計)人: | 楊靜文;王天明;宋伊敏;梁晶;陳旭;呂振明 | 申請(專利權)人: | 浙江海洋大學 |
| 主分類號: | C07K14/435 | 分類號: | C07K14/435;C12N15/12;C12N15/85;A01K61/00;A23K50/80;A23K20/147 |
| 代理公司: | 杭州千克知識產權代理有限公司 33246 | 代理人: | 黃周榮 |
| 地址: | 316022 浙江省舟山市普陀海*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 曼氏無針烏賊 神經肽Y 重組表達 基因序列 重組基因 轉染細胞 培養液 重組質粒轉染 分泌信號肽 胞外分泌 骨架質粒 皮下注射 生長發育 宿主細胞 依次排列 重組質粒 攝食率 修飾肽 酶切 投喂 應用 申請 | ||
1.一種曼氏無針烏賊神經肽Y,其特征在于,至少具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。
2.如權利要求1所述的曼氏無針烏賊神經肽Y的重組表達方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)獲得表達所述的曼氏無針烏賊神經肽Y的重組基因,所述的重組基因包括自5’端至3’端依次排列的分泌信號肽基因序列、曼氏無針烏賊神經肽Y基因序列及酶切修飾肽段基因序列;
(2)將所述的重組基因插入到骨架質粒中,獲得重組質粒;
(3)將所述的重組質粒轉染至宿主細胞中,獲得轉染細胞;
(4)培養所述的轉染細胞,收集轉染細胞培養液,獲得轉染細胞分泌的曼氏無針烏賊神經肽Y。
3.如權利要求2所述的曼氏無針烏賊神經肽Y的重組表達方法,其特征在于,所述的分泌信號肽的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
4.如權利要求2所述的曼氏無針烏賊神經肽Y的重組表達方法,其特征在于,所述的酶切修飾肽段具有酰胺化修飾位點和酶切位點。
5.如權利要求2所述的曼氏無針烏賊神經肽Y的重組表達方法,其特征在于,所述的酶切修飾肽段的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。
6.如權利要求2-5中任意一項所述的曼氏無針烏賊神經肽Y的重組表達方法,其特征在于,所述的重組基因的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。
7.如權利要求1所述的曼氏無針烏賊神經肽Y在促進曼氏無針烏賊生長發育中的應用。
8.如權利要求7所述的應用,其特征在于,將所述的曼氏無針烏賊神經肽Y制成溶液,將該溶液經皮下注射曼氏無針烏賊。
9.如權利要求8所述的應用,其特征在于,該溶液中曼氏無針烏賊神經肽Y的濃度為5-20mM,在曼氏無針烏賊體重在20-50g時開始注射,每3-4天注射一次直至采收,每次注射量為40-60μL。
10.如權利要求7所述的應用,其特征在于,將所述的曼氏無針烏賊神經肽Y拌入餌料中,投喂給曼氏無針烏賊。
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