[發明專利]一種吲哚-3-甲醛的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201810678248.1
• 申請日: 2018-06-27
• 公開（公告）號: CN108624633B
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發明（設計）人: 譚琳;譚凱;伊莎貝爾;范夢凱;孫香榮
• 申請（專利權）人: 中國熱帶農業科學院海口實驗站
• 主分類號: C12P17/10
• 分類號: C12P17/10;C07D209/12;A61P19/06;C12R1/63
• 代理公司: 北京匯思誠業知識產權代理有限公司 11444
• 代理人: 王剛;龔敏

1.一種制備吲哚-3-甲醛的方法，該方法包括以下步驟：

（1）將新喀里多尼亞弧菌(Vibrio neocaledonicus sp)CGJ02-2接種到LB液體培養基中進行培養，培養結束后離心去掉菌體，收獲發酵上清液；

（2）用有機溶劑萃取發酵上清液，將有機相減壓濃縮，獲得粗提物；

（3）從得到的粗提物中分離出吲哚-3-甲醛；

其中，所述新喀里多尼亞弧菌CGJ02-2的保藏中心保藏編號CCTCC NO：M2017802。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟（1）中，所述LB液體培養基的配方為：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，NaCl的濃度為0.02g/ml。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟（1）中，新喀里多尼亞弧菌CGJ02-2在25~32℃的溫度下培養7~15天。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟（2）中，所述有機溶劑為乙酸乙酯。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，在步驟（2）中，乙酸乙酯與發酵液的體積比為3~1：1，萃取進行3次，每次萃取12~36小時。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟（2）中，減壓濃縮在40℃~45℃的溫度下進行。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟（3）中，所述分離為：采用硅膠柱進行層析，收集目標洗脫液，濃縮除去有機溶劑，得到吲哚-3-甲醛。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，在步驟（3）中，所述層析的操作如下：

（A）將乙酸乙酯粗提物用硅膠柱進行層析，以100%的正己烷，體積比為8.5~9∶1~1.5的正己烷-乙酸乙酯、體積比為7.5~8∶2~2.5的正己烷-乙酸乙酯、體積比為6.5~7∶3~3.5的正己烷-乙酸乙酯、體積比為5.5~6∶4~4.5的正己烷-乙酸乙酯、體積比為4.5~5∶4.5~5的正己烷-乙酸乙酯，100%的乙酸乙酯、體積比為8.5~9∶1~1.5的乙酸乙酯-甲醇、體積比為6.5~7∶3~3.5的乙酸乙酯-甲醇、體積比為4.5~5∶4.5~5的乙酸乙酯-甲醇、100%的甲醇進行洗脫，根據洗脫液流出順序和薄層層析色譜的檢測結果，將組分合并成7個亞組分F1~F7；

（B）對步驟（A）得到的亞組分F6繼續用硅膠柱進行層析，依次用體積比為6~8∶2~4的正己烷-丙酮、體積比為5~7∶3~5的正己烷-丙酮，體積比為1~2∶1~2的正己烷-丙酮、100%丙酮、100%甲醇進行洗脫，根據洗脫液流出順序和薄層層析色譜的檢測結果，將洗脫液分成3個亞組分F6.1、F6.2和F6.3；

（C）對（B）步驟得到的亞組分F6.2用硅膠柱進行層析，依次用體積比為6~8∶2~4的正己烷-丙酮、體積比為1~2∶1~2的正己烷-丙酮、100%甲醇依次進行梯度洗脫，根據洗脫液流出順序和薄層層析色譜的檢測結果，將洗脫液分成兩個亞組分F6.2.1和F6.2.2；

（D）對步驟（C）得到的F6.2.1用制備型薄層層析板分離，流動相為體積比為5~7∶3~5的正己烷-丙酮，獲得三個亞組分為F6.2.1.1、F6.2.1.2和F6.2.1.3，其中F6.2.1.1為吲哚-3-甲醛。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，在步驟（A）、（B）和（C）中，硅膠柱所用的填料為60-100目的硅膠。