[發明專利]瓜蔞的組織培養方法在審
| 申請號: | 201810677701.7 | 申請日: | 2018-06-27 |
| 公開(公告)號: | CN108935099A | 公開(公告)日: | 2018-12-07 |
| 發明(設計)人: | 汪錫文;裴寶平;邱許鳳 | 申請(專利權)人: | 蕪湖東源新農村開發股份有限公司 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
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| 地址: | 241300 安*** | 國省代碼: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 組織培養 瓜蔞 初代培養基 生根培養基 增殖培養基 幼苗 繁殖率 分化 芐基腺嘌呤 熱處理 低溫處理 二次滅菌 酒精溶液 卡那霉素 生根培養 誘導培養 增殖培養 吲哚丁酸 培養基 多效唑 番茄汁 外植體 香蕉泥 玉米素 萘乙酸 肌醇 煉苗 切段 脫菌 成活率 | ||
本發明公開了一種瓜蔞的組織培養方法,包括:1)將瓜蔞莖切段作為外植體進行熱處理脫菌,接著置于酒精溶液中進行二次滅菌,然后置于初代培養基中進行誘導培養、于增殖培養基中進行增殖培養得到分化幼苗;2)將分化幼苗于生根培養基中進行生根培養、接著置于5℃以下進行低溫處理以得到組織培養苗;3)將組織培養苗煉苗;其中,初代培養基為含有萘乙酸NAA、6?芐基腺嘌呤6?BA和肌醇的MS培養基;增殖培養基為含有玉米素ZT、卡那霉素、2,4?D和番茄汁的MS培養基;生根培養基含有多效唑、吲哚丁酸IBA和香蕉泥的1/2MS培養基。該瓜蔞的組織培養方法具有優異的成活率以及繁殖率。
技術領域
本發明涉及組織培養,具體地,涉及一種瓜蔞的組織培養方法。
背景技術
瓜蔞是葫蘆科,又稱栝樓,屬多年生攀緣草本,長可達10米。根狀莖肥厚,圓柱狀,外皮黃色。莖多分枝,無毛;葉互生,近圓形或心形,雌雄異株;雄花數朵總狀花序,少有單生,花冠裂片倒卵形,雌花單生,子房卵形,果實近球形,熟時橙紅色,花果期7-11月。瓜蔞分布于中國遼寧、華北、華東、中南、陜西、甘肅、四川、貴州和云南。生于海拔200-1800米的山坡林下、灌叢中、草地和村旁田邊。因本種為傳統中藥天花粉和栝樓,故在其自然分布區內、外,廣為栽培,分布于朝鮮、日本、越南和老撾。瓜蔞有解熱止渴、利尿、鎮咳祛痰等作用。種子含脂花肪油;果實含三萜皂苷、有機酸、樹脂、糖類、色素;根含蛋白質、皂苷、酸類。
瓜蔞的繁殖方法有兩種,其中,分根繁殖:3月中下旬挖取3-5年生斷面白色新鮮的健壯雌株的老根,分成7-10cm的小段,穴栽,澆足水,約10余天出苗,每年結合中耕施追肥2-3次。種子繁殖:9-10月采收果實,待果皮稍軟,取出種子以草木灰拌種擦去果肉,干藏過冬;亦可帶果梗懸掛于通風處。冷床育苗在早春進行,將種子尖頭插入土中,常噴水保持苗床濕潤、待種子萌動時,開始通氣,床溫控制在22℃左右,約10日后出土,見真葉伸出即可上盆或分栽培育。直播在4月進行,選擇土壤肥沃,排水良好之地,開穴施足基肥,穴距30x40厘米。覆土后點播種子,再蓋厚2厘米泥,約半個月出土,當有真葉2片時每穴留苗1株,待蔓長至50厘米時插引桿。但是瓜蔞野生資源有限且遭嚴重破壞,盡管各地有少量引種栽培,但是其產量缺遠不能滿足市場要求。
發明內容
本發明的目的是提供一種瓜蔞的組織培養方法,該瓜蔞的組織培養方法具有優異的成活率以及繁殖率。
為了實現上述目的,本發明提供了一種瓜蔞的組織培養方法,包括:
1)將瓜蔞莖切段作為外植體進行熱處理脫菌,接著置于酒精溶液中進行二次滅菌,然后置于初代培養基中進行誘導培養、于增殖培養基中進行增殖培養得到分化幼苗;
2)將分化幼苗于生根培養基中進行生根培養、接著置于5℃以下進行低溫處理以得到組織培養苗;
3)將組織培養苗煉苗;
其中,步驟1)-2)的培養條件均至少符合以下條件:無菌且透氣;初代培養基為含有萘乙酸NAA、6-芐基腺嘌呤6-BA和肌醇的MS培養基;增殖培養基為含有玉米素ZT、卡那霉素、2,4-D和番茄汁的MS培養基;生根培養基含有多效唑、吲哚丁酸IBA和香蕉泥的1/2MS培養基。
在上述技術方案中,本發明以瓜蔞莖切段作為外植體,然后依次經過誘導培養、增殖培養、生根培養、煉苗以得到成熟的瓜蔞苗,在各個培養工序中采用特定的培養基進而使得得到的瓜蔞苗具有優異的成活率和高產率,在此基礎上能夠大面積的進行培育瓜蔞,從而為瓜蔞的組織培養的推廣奠定了堅實的基礎。
本發明的其他特征和優點將在隨后的具體實施方式部分予以詳細說明。
具體實施方式
以下對本發明的具體實施方式進行詳細說明。應當理解的是,此處所描述的具體實施方式僅用于說明和解釋本發明,并不用于限制本發明。
本發明提供了一種瓜蔞的組織培養方法,包括:
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