[發明專利]一種聯合定量檢測尿液微量白蛋白和胱抑素C的試紙條

在審

• 申請號: 201810648721.1
• 申請日: 2018-06-22
• 公開（公告）號: CN108918876A
• 公開（公告）日: 2018-11-30
• 發明（設計）人: 王云龍;銀芳穎;李玉林;王繼創;程蕾;王敏
• 申請（專利權）人: 河南省生物工程技術研究中心有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/68;G01N33/533;G01N33/558
• 代理公司: 鄭州銘晟知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 41134
• 代理人: 張鵬

本發明公開了一種聯合定量檢測尿液微量白蛋白和胱抑素C的試紙條，包括底板、樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，結合墊上固定有抗人白蛋白單克隆抗體?熒光微球復合物、胱抑素C配對單克隆抗體?熒光微球復合物、羊抗兔IgG?熒光微球復合物；抗人白蛋白單克隆抗體?熒光微球復合物是由抗人白蛋白單克隆抗體與熒光微球通過EDC、NHS兩步法偶聯形成,胱抑素C單克隆抗體?熒光微球復合物是由胱抑素C單克隆抗體與熒光微球通過EDC、NHS兩步法偶聯形成,羊抗兔IgG?熒光微球復合物是由羊抗兔IgG與熒光微球通過EDC一步法偶聯形成。本發明提供一種操作簡便、快速檢測、靈敏度高、成本低廉，且適合床旁快速檢測的聯合定量檢測尿液微量白蛋白和胱抑素C的試紙條。

技術領域

本發明涉及疾病診斷技術領域，具體涉及一種聯合定量檢測尿液微量白蛋白和胱抑素C的試紙條。

背景技術

腎臟的生理功能主要是排泄代謝廢物及調節水、電解質酸堿平衡，分泌多種活性物質，維持機體內環境穩定，以保證機體的正常生理功能。近年來由于生活習性、飲食結構等的變化，使高血壓、糖尿病等發病率呈現逐步增高趨勢。而這些疾病很容易累及腎臟，導致腎臟功能損傷，但由于腎臟有較強的代償能力，在早期并沒有明顯的臨床特征，往往被人們所忽視，當出現明顯癥狀時已處于中晚期，對患者的治療及預后帶來很大影響。早診斷、早治療以逆轉損傷的腎功能是唯一能阻止腎臟疾病惡化的方法。因此，腎功能損傷的早期篩查診斷就顯得尤為重要。

長期用于腎功能損傷檢測的體系包括腎小球損傷標志物、腎小管損傷標志物和腎小球濾過率標志物等，這些生物標志物的檢測對協助腎臟疾病的早期診斷治療和預后的評價具有重要意義。

腎小球濾過率是評價腎功能損傷最簡便的方法，眾所周知，其評價指標有外源性標志物和內源性標志物。外源性指標包括菊粉清除率和放射性核素物質測定，菊粉經腎小球濾過，無腎小管重吸收和分泌，可準確反映腎小球濾過功能，被稱為“金標準”，但菊粉清除率檢測不方便，尤其需要靜脈輸注，而且菊粉清除還可能受血糖影響；放射性標志物清除率檢測價格昂貴，標本需特殊處理和放射顯影，某些患者（如妊娠早期婦女）不宜接受而限制其應用。內源性指標包括肌酐、尿素、尿酸和一些低分子量蛋白等，它們不同程度的受一些腎前性或腎性因素干擾。目前臨床常用檢測肌酐、尿素等來評估腎功能受損情況，其存在敏感性低的缺點，當腎小球濾過率降至正常的50%時，肌酐、尿素值仍在正常范圍內；腎小球濾過率降至正常的1/3時，肌酐、尿素會迅速增高，且腎小球濾過率降低和肌酐、尿素升高之間無線性關系，故肌酐、尿素并不能很好的反映早期腎功能損傷情況。

腎小球早期損傷主要表現為腎小球濾過膜的屏障作用受損，在尿中可檢出微量蛋白。目前研究最多的是白蛋白。人體代謝正常情況下，尿中的白蛋白極少，每升尿液中白蛋白不超過20mg，所以稱尿微量白蛋白。當尿中的微量白蛋白在20-200mg/L范圍內，就屬于微量白蛋白尿。腎臟是人體重要的排泄器官，糖尿病、高血壓、某些自身免疫疾病等都能導致腎臟損傷，而在這些病人發展成明顯腎臟損傷之前要經過一個初始的腎臟損傷也就是微量白蛋白尿階段。早期腎損傷即微量白蛋白尿階段的病人常無臨床癥狀，且尿常規檢查正常，此時進行早期治療是可以逆轉的。因此，尿微量白蛋白對早期腎功能損傷診斷具有重要意義。

腎小管標記蛋白可分為3類：腎小管上皮細胞的各種酶（統稱尿酶）、低分子量蛋白和各段腎小管脫落的抗原性物質。胱抑素C是一種小分子量的半胱氨酸蛋白酶抑制劑，非糖基化的堿性蛋白，相對分子質量為13.3kD，由122個氨基酸殘基組成，可由機體所有有核細胞產生，產生率恒定，只能通過腎小球濾過，完全被腎小管上皮細胞重吸收并于細胞內降解，不受腎外其他因素（如性別、年齡、飲食、炎性反應等）的干擾，且當腎功能早期受損時，尿胱抑素C 濃度將迅速增加至100倍之多。因此，通過檢測尿液胱抑素C濃度可以為腎功能損傷提供一個敏感而又準確可靠的評價指標，對腎病患者早期腎損害的發現有重要臨床價值。