[發明專利]用于檢測綠僵菌植物內生性的綠色熒光蛋白標記基因egfp特異性引物、試劑盒及方法在審
| 申請號： | 201810648106.0 | 申請日： | 2018-06-19 |
| 公開（公告）號： | CN108913796A | 公開（公告）日： | 2018-11-30 |
| 發明（設計）人： | 農向群;蔡霓;王峰;王廣君;曹廣春;涂雄兵;張澤華 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院植物保護研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京法思騰知識產權代理有限公司 11318 | 代理人： | 高宇 |
| 地址： | 100093 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 綠僵菌 綠色熒光蛋白標記 特異性引物 基因egfp 試劑盒 驗證 農業技術領域 熒光蛋白基因 合成綠色 共生性 靈敏度 植物根 專屬性 檢測 綠漿 | ||
1.用于檢測綠僵菌植物內生性的綠色熒光蛋白標記基因egfp特異性引物，其特征在于，包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列為5'-AGTCAGTCTCCCTTGCGGTT；所述下游引物的核苷酸序列為5'-TGGGTGCTCAGGTAGTGGTT。
2.根據權利要求1所述的綠僵菌植物內生性的綠色熒光蛋白標記基因egfp特異性引物，其特征在于，所述植物為玉米或羊草。
3.檢測綠僵菌在植物中內生性的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權利要求1所述的用于檢測綠僵菌植物內生性的綠色熒光蛋白標記基因egfp特異性引物，以及綠色熒光蛋白標記基因egfp。
4.檢測綠僵菌植物內生性的方法，其特征在于，所述方法包括利用權利要求1所述的用于檢測綠僵菌植物內生性的綠色熒光蛋白標記基因egfp特異性引物擴增綠僵菌的綠色熒光蛋白標記基因egfp的步驟。
5.根據權利要求4所述的檢測綠僵菌植物內生性的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
(1)將標記有綠色熒光蛋白基因egfp的綠僵菌孢子與植物共培養；
(2)采集植物樣本，提取植物DNA；
(3)用權利要求1所述的用于檢測綠僵菌植物內生性的綠色熒光蛋白標記基因egfp特異性引物擴增步驟(2)提取的植物DNA，判斷是否得到特異性擴增結果。
6.根據權利要求5所述的檢測綠僵菌植物內生性的方法，其特征在于，步驟(2)中，采集植物樣本，并制作樣本切片，在488nm下，檢視樣品切片中是否含有綠色熒光菌絲。
7.根據權利要求4所述的檢測綠僵菌植物內生性的方法，其特征在于，所述植物為玉米或羊草。
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