[發(fā)明專利]一種唾液酸電化學(xué)試紙及其制備與檢測方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810646962.2 | 申請日: | 2018-06-22 |
| 公開(公告)號(hào): | CN108548854B | 公開(公告)日: | 2023-05-26 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 梁明龍;劉勤;伍壽勝;李中;廖姍 | 申請(專利權(quán))人: | 桂林中輝科技發(fā)展有限公司;桂林樂爾醫(yī)療器械有限公司 |
| 主分類號(hào): | G01N27/26 | 分類號(hào): | G01N27/26;G01N27/30;G01N27/327 |
| 代理公司: | 桂林市華杰專利商標(biāo)事務(wù)所有限責(zé)任公司 45112 | 代理人: | 王儉 |
| 地址: | 541199 廣西壯族自治*** | 國省代碼: | 廣西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 唾液酸 電化學(xué) 試紙 及其 制備 檢測 方法 | ||
1.一種唾液酸電化學(xué)試紙的制備方法,其特征在于,所述唾液酸電化學(xué)試紙包括
絕緣基片;
導(dǎo)電電極,所述導(dǎo)電電極包括設(shè)置在絕緣基片上的三條條狀導(dǎo)電電極,分別為工作電極、參比電極和短路電極,其中設(shè)置在導(dǎo)電電極傳導(dǎo)區(qū)一端的短路電極與工作電極或參比電極相接;
絕緣隔離層,所述絕緣隔離層局部覆蓋于導(dǎo)電電極上,絕緣隔離層的一端露出導(dǎo)電電極的反應(yīng)區(qū),另一端露出導(dǎo)電電極的傳導(dǎo)區(qū);
反應(yīng)層,所述反應(yīng)層為酶反應(yīng)膜,所述酶反應(yīng)膜覆蓋于反應(yīng)區(qū)的參比電極及工作電極表面,位于絕緣隔離層的反應(yīng)區(qū)端;
前處理層,所述前處理層設(shè)置在反應(yīng)層的前端,覆蓋于反應(yīng)區(qū)的參比電極及工作電極表面;
虹吸導(dǎo)樣槽,所述反應(yīng)層和前處理層設(shè)置在虹吸導(dǎo)樣槽內(nèi);虹吸導(dǎo)樣槽的前端為采樣口;
粘合隔片,所述粘合隔片與絕緣隔離層、前處理層、反應(yīng)層和虹吸導(dǎo)樣槽的上端面疊接;
所述酶反應(yīng)膜包括與唾液酸反應(yīng)的酶和一種電子傳遞介體,所述酶為神經(jīng)氨酸苷酶、神經(jīng)氨酸醛縮酶、酮胺氧化酶或過氧化物酶中的一種或組合,其中,神經(jīng)氨酸苷酶含量為1%-3%、神經(jīng)氨酸醛縮酶含量為0.1%-1%、酮胺氧化酶含量為0.5%-2%,過氧化物酶0.5%-2%;所述電子傳遞介體為亞鐵氰化鉀,質(zhì)量分?jǐn)?shù)含量為3%-10%;
所述前處理層的漿液中含有唾液酸水解劑,所述唾液酸水解劑含量為2.0%-8.5%;
所述制備方法包括如下步驟:
1)采用絲網(wǎng)印刷技術(shù)在0.25mm厚PET塑料基片上制作工作電極、參比電極和短路電極,通過絲網(wǎng)印刷將導(dǎo)電油墨在PET塑料基片上鋪上分散均勻的油墨薄層后,放到80℃烘箱中烘干60min;
2)采用絲網(wǎng)印刷技術(shù)在印好電極系統(tǒng)的基片上印刷絕緣漆作為電絕緣隔離層,通過絲網(wǎng)印刷將絕緣漆在PET塑料基片上鋪上分散均勻的油墨薄層后,放到紫外烘干機(jī)烘干1分鐘;
3)用點(diǎn)酶機(jī)在電極表面固定酶反應(yīng)膜用于血液唾液酸的檢測,所取酶反應(yīng)液的各組分及其重量百分比見表1:
表1
取4μL酶反應(yīng)液滴加到電極表面,50℃烘干20min,備用;
4)用點(diǎn)酶機(jī)在前處理區(qū)表面固定前處理層用于對樣品中的結(jié)合唾液酸進(jìn)行水解,所取前處理層漿液的各組分及其重量百分比見表2:
表2
取4μL前處理層漿液滴加到前處理區(qū)絕緣基片表面,50℃烘干20min,備用;
5)前處理層漿液固定后,用粘合隔片將表面封裝片、PET基片粘合,粘合隔片上設(shè)有開槽,對應(yīng)于電極反應(yīng)區(qū)域,及暴露電極上有酶反應(yīng)試劑的一端,以及參比電極和短路電極,PET基片、粘合隔片和表面封裝片組成虹吸導(dǎo)樣槽及采樣口。
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