[發明專利]一種總膽汁酸檢測試劑、試紙及檢測方法與應用

在審

• 申請號: 201810646870.4
• 申請日: 2018-06-22
• 公開（公告）號: CN108802157A
• 公開（公告）日: 2018-11-13
• 發明（設計）人: 劉勤;梁明龍;伍壽勝;李中;廖姍
• 申請（專利權）人: 桂林中輝科技發展有限公司;桂林樂爾醫療器械有限公司
• 主分類號: G01N27/416
• 分類號: G01N27/416
• 代理公司: 桂林市華杰專利商標事務所有限責任公司 45112
• 代理人: 王儉

1.一種總膽汁酸檢測試劑，其特征在于，包括酶反應液，所述酶反應液包括如下重量百分比的組分：

3α-羥基類固醇脫氫酶1.0%-2.2%；

鐵氰化鉀3.0%-20.0%；

羧甲基纖維素1.0%-6.0%；

AD+，氧化態的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 0.5%-3.0%；

pH值為7.0的磷酸鉀緩沖液65%-80%；

醫藥級蒙脫石鈣1.0%-10.0%。

2.一種總膽汁酸檢測試紙，其特征在于，包括

一絕緣基片；

一位于絕緣基片上的電極系統，所述電極系統包括三條導電電極，分別為工作電極、參比電極和短路電極，其中的短路電極與工作電極或參比電極相接；

一局部覆蓋于電極系統上的絕緣隔離層，使得在未覆蓋絕緣隔離層所裸露出的電極系統區域，形成一容納樣品溶液空間的電化學電極反應區；

一位于電化學電極反應區的酶反應膜，所述酶反應膜包括至少一種電子介體、至少一種總膽汁酸吸附劑、還包括緩沖液、粘合劑及表面活性劑；

在所述的絕緣隔離層的上方設有一粘合隔片，所述粘合隔片上開設有相互連通的采樣口和虹吸導樣槽，其中采樣口設置于遠離絕緣基片上電極傳導部的一端，虹吸導樣槽的開設位置與絕緣隔離層上電化學電極反應區的位置相對應。

3.根據權利要求2所述的總膽汁酸檢測試紙，其特征在于，所述絕緣隔離層的電化學電極反應區設有反應窗口，反應窗口的跨度為同時覆蓋工作電極和參比電極；所述酶反應膜與反應窗口相對應。

4.根據權利要求2所述的總膽汁酸檢測試紙，其特征在于，所述酶反應膜包括

酶，為3α-羥基類固醇脫氫酶；

電子介體，為鐵氰化鉀、二茂鐵及其衍生物、釕的絡合物或苯醌類化合物中的一種或幾種；

緩沖液，為磷酸緩沖液、MES緩沖液、檸檬酸緩沖液中的一種；

總膽汁酸吸附劑，為蒙脫石。

5.根據權利要求2或4所述的總膽汁酸檢測試紙，其特征在于，所述總膽汁酸吸附劑干重含量為1%-10%。

6.根據權利要求2或4所述的總膽汁酸檢測試紙，其特征在于，所述總膽汁酸吸附劑直徑為0.5μm -7μm。

7.根據權利要求2或4所述的總膽汁酸檢測試紙，其特征在于，所述酶反應膜中的總膽汁酸檢測試劑包括如下重量百分比的組分：

3α-羥基類固醇脫氫酶1.0%-2.2%；

鐵氰化鉀3.0%-20.0%；

羧甲基纖維素1.0%-3.0%；

AD+，氧化態的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 0.5%-3.0%；

pH值為7.0的磷酸鉀緩沖液65%-80%；

醫藥級蒙脫石鈣或醫藥級蒙脫石鈉1%-10%。

8.權利要求2-7任一項所述的總膽汁酸檢測試紙在制備總膽汁酸檢測試紙中的應用。

9.權利要求1所述的總膽汁酸檢測試劑在制備總膽汁酸檢測試紙中的應用。

10.利用權利要求2-7任一項所述的總膽汁酸檢測試紙進行總膽汁酸檢測的方法，其特征在于，包括如下步驟：

一、制作線性曲線圖：

收集比重為1.018的新鮮尿液，配制尿液膽汁酸濃度為0，10, 25, 50,100,200,300μmol/L的尿樣；

將總膽汁酸檢測試紙置于配套的多參數分析儀中并在工作電極和參比電極兩端施加300mV工作電壓；

取尿樣10-100μL加到總膽汁酸檢測試紙的采樣口，尿液通過虹吸導樣槽自動吸取2μL樣品，在多參數分析儀上可檢測出與總膽汁酸濃度相對應的電流值；

以總膽汁酸的濃度為橫坐標，電流值為縱坐標，繪制出總膽汁酸濃度與電流值的線性關系圖；

二、測量被測樣品的總膽汁酸濃度值：

將總膽汁酸檢測試紙置于多參數分析儀中并在總膽汁酸檢測試紙的工作電極和參比電極兩端施加300mV工作電壓；

取被測樣品尿樣10-100μL加到總膽汁酸檢測試紙的采樣口，尿液通過虹吸導樣槽自動吸取2μL樣品，在多參數分析儀上檢測出與取被測樣品總膽汁酸濃度相對應的電流值；

該電流值對應的總膽汁酸濃度可直接從上述線性關系圖上得出，從而得到被測樣品的總膽汁酸濃度值。