[發(fā)明專利]RAA熒光法檢測裂谷熱病毒的引物探針組及試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810644415.0
• 申請日: 2018-06-21
• 公開（公告）號: CN108624720A
• 公開（公告）日: 2018-10-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭偉;吳忠華;麻慧君;黃雷;楊永耀;郭利川;湯賽君;王智宏;應(yīng)清界
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江國際旅行衛(wèi)生保健中心（浙江出入境檢驗檢疫局口岸門診部）;江蘇奇天基因生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 劉奇

1.RAA熒光法檢測裂谷熱病毒的引物探針組，包括上游引物、下游引物和探針，其特征在于，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQID NO.2所示，所述探針為在SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的第28位堿基修飾熒光報告基團、第29位堿基替換為四氫呋喃殘基和第30位堿基修飾熒光淬滅基團的物質(zhì)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物探針組，其特征在于，所述熒光報告基團包括FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX、Cy3或Cy5。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物探針組，其特征在于，所述熒光淬滅基團包括TAMRA、Eclipse、BHQ1、BHQ2、BHQ3或DABCYL。

4.RAA熒光法檢測裂谷熱病毒的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權(quán)利要求1～3任意一項所述的引物探針組。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述的探針使用濃度為0.01～0.03mM。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述上游引物和下游引物的使用濃度獨立地為0.02～0.05mM。

7.根據(jù)權(quán)利要求4～6任意一項所述的試劑盒，其特征在于，還包括RAA基礎(chǔ)熒光通用反應(yīng)試劑和反應(yīng)緩沖液。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述反應(yīng)緩沖液包括：使用濃度為500mMpH值為7.4的Tris-HCl緩沖液、240mM的MgAc和質(zhì)量分數(shù)為10％的PEG 10000。

9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于，還包括：陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品；

所述陰性質(zhì)控品為ddH₂O或純化水；

所述陽性質(zhì)控品為裂谷熱病毒重組DNA質(zhì)粒。