[發明專利]通用型靶向CD19抗原嵌合受體T細胞的制備及其應用

有效

• 申請號: 201810636413.7
• 申請日: 2018-06-20
• 公開（公告）號: CN110616189B
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發明（設計）人: 彭作翰;李玏
• 申請（專利權）人: 西安桑尼賽爾生物醫藥有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/113;C12N15/864;A61K35/17;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 關旭穎

本發明涉及通用型靶向CD19抗原嵌合受體T細胞的制備及其應用。本發明具體涉及一種制備靶向CD19抗原嵌合受體T細胞的方法，所述方法包括將基因編輯物質遞送至T細胞以剪切TRAC和B2M基因；和將靶向CD19 CAR和B2M?HLA?E融合基因克隆至修復模板載體中以同時向T細胞導入靶向CD19 CAR和B2M?HLA?E融合基因同源重組修復模板。所述通用型靶向CD19抗原嵌合受體T細胞具有異體移植排斥反應小、產量高、安全性高、即時可用和適用范圍廣等優點。

技術領域

本發明涉及細胞治療領域，特別涉及包括通用型靶向CD19抗原嵌合受體T細胞的細胞治療領域。

背景技術

CAR-T治療

傳統腫瘤治療藥物包括化療藥、靶向藥，雖然它們在一定程度上提高了癌癥患者的生存期，但同時也帶來了嚴重的副作用，極大地降低了病人的生存質量。更不幸的是，大部分患者在接受這些傳統治療后仍舊會復發，而一旦復發，無藥可救是大概率事件。

近年來，隨著免疫治療的發展，免疫檢驗點抑制劑藥物(如CTLA-4、PD-1/PD-L1抗體)的出現，徹底改變了腫瘤治療的方式。但這類藥物在不同癌癥病人中的有效率只有20％-40％，仍然有大部分的癌癥患者等待新的有效治療方式的出現。

嵌合抗原受體T細胞(CAR-T細胞)治療技術是通過體外轉導一個識別癌細胞的人工基因于人體T細胞上，使人T細胞具有特異殺傷腫瘤細胞的能力。CAR-T細胞治療屬于過繼性免疫療法(adoptive cell transfer，ACT)，它利用人體免疫細胞來對抗腫瘤，被稱為“活體藥物”。這種ACT療法在近年已應用于臨床實驗當中，特別是在兒童白血病方面的有效探索，為研究者以及醫生開辟了一條治療腫瘤的新路徑。2017年末，兩款CAR-T藥物獲得美國FDA的許可上市，這種ACT療法與傳統藥物相比具有如下創新點：

首先，精確靶向腫瘤，且副作用可逆。CAR-T細胞治療相比化療藥、靶向藥具有更特異的腫瘤細胞殺傷能力。在輸入病人體內后，雖然短時間內會產生細胞因子效應，但該副反應可控，病人在獲得完全緩解的情況下基本上能和健康人一樣生活。

其次，持續緩解時間長。CAR-T細胞部分屬于記憶T細胞，在輸入病人體內后能長期存在于病人身體中，時刻監視身體中是否出現腫瘤細胞，一旦有新的腫瘤細胞出現就會立刻將其殺滅。

其中，靶向CD19 CAR-T細胞治療已在臨床實驗階段被用于復發難治的急性淋巴白血病、慢行淋巴白血病、非霍奇金淋巴瘤，也有見報道稱用于多發性骨髓瘤。在上述適應癥中，靶向CD19 CAR-T取得了極高的完全緩解率，特別是在急性淋巴白血病中取得了超過80％的完全緩解率。在靶向CD19 CAR-T治療中也出現了一些問題：首先是短時間副作用大，主要是細胞因子風暴和神經毒性，超過一半的病人都有不同程度的上述副作用；其次是復發問題，據不同研究結果分析，有超過一半的病人在經過靶向CD19 CAR-T細胞治療一年后會復發，復發的原因包括腫瘤抗原逃逸和輸入CAR-T細胞耗竭等。

雖然，自體CAR-T在我國已如火如荼地進行著臨床研究以及產業化的進程，但因特殊的技術特點，其在商業化的道路上仍有一些障礙：

首先，價格高昂。“私人訂制”式的生產導致高昂的價格，諾華上市的CD19 CAR-T細胞制品Kymirah售價高達47.5萬美金，風箏制藥上市的Yescarta售價34.7萬美金，對于中國患者是難以承受的負擔。

其次，訂制時間長。訂制式的CAR-T細胞需要15～20天的培養時間，對于晚期惡性腫瘤患者，病情緊急，無法及時給藥，病人可能在藥品制備的等待中去世。

再次，具有使用限制自體CAR-T的制備非常依賴于病人自身的T細胞狀態，往往對于經過多次化療的病人，其T細胞并不適合用來制作CAR-T，其使用受到限制。據不完全統計，有10％左右的血液腫瘤患者其T細胞不具備訂制自體CAR-T的條件，因此無法使用。