[發(fā)明專利]一種包含共刺激受體的嵌合抗原受體及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810636409.0
• 申請日: 2018-06-20
• 公開（公告）號: CN110615842B
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊選明;傅陽心;汪鑫;葉圣勤;李范林;張會會
• 申請（專利權(quán)）人: 上海隆耀生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N5/10;C12N15/867;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 上海申新律師事務(wù)所 31272
• 代理人: 俞滌炯

本發(fā)明涉及一種包含共刺激受體的嵌合抗原受體，該嵌合抗原受體的結(jié)構(gòu)為scFv(X)?(Y)CD3zeta?2A?(Z)；其中，X包括腫瘤靶向抗體或能與腫瘤特異結(jié)合的配體、受體；Y為共刺激受體的胞內(nèi)區(qū)，Z為共刺激受體，所述共刺激受體選自ICOS、CD28、CD27、HVEM、LIGHT、CD40L、4?1BB、OX40、DR3、GITR、CD30、TIM1、SLAM、CD2、CD226。本發(fā)明還涉及一種由上述嵌合抗原受體的重組表達載體構(gòu)建的CAR?T細胞及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明所述的CAR?T細胞顯著提高了腫瘤殺傷能力和擴增能力，將共刺激受體信號整合在CAR?T中，具有潛在的增強效應(yīng)的功能，且只對CAR?T細胞有作用，降低了造成免疫副作用的風(fēng)險。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及細胞免疫治療技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種包含共刺激受體的嵌合抗原受體及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

利用免疫學(xué)治療手段來攻克腫瘤，一直是免疫學(xué)在轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)方面應(yīng)用的重要方向。隨著各種組學(xué)(基因組學(xué)，蛋白組學(xué)等)的發(fā)展，腫瘤細胞由于突變產(chǎn)生的免疫原性得到了廣泛的認可，這為腫瘤免疫治療奠定了理論的基礎(chǔ)。同時，隨著腫瘤免疫學(xué)研究自身的積累，腫瘤免疫治療近期取得了巨大的進步，一系列新的免疫治療手段逐步進入臨床。當前的腫瘤免疫學(xué)研究，奠定了T細胞殺傷在腫瘤免疫治療中的中心地位，而嵌和抗原受體T細胞(CAR-T細胞)就是結(jié)合了抗體的靶向識別和T細胞的腫瘤殺傷功能，人工修飾生成的腫瘤殺傷細胞。

嵌和抗原受體T細胞的概念最早在1989年被Gross，Waks和Eshhar提出，他們將識別TNP的抗體表達在T細胞上，實現(xiàn)了抗原特異性的、非MHC限制的T細胞的活化和效應(yīng)的增強，并提出了CAR-T技術(shù)在腫瘤治療中的應(yīng)用的概念。根據(jù)這一原理，將具有腫瘤特異性的抗體嵌入T細胞，將賦予T細胞新的殺瘤能力。之后，CAR-T技術(shù)被引入到抗腫瘤臨床試驗中，但早期的CAR-T細胞由于其胞內(nèi)信號傳遞域僅含有第一信號，而且選擇的腫瘤類型為實體瘤，最終的臨床結(jié)果都不太理想。在2008年，F(xiàn)red?Hutchison腫瘤研究所等機構(gòu)使用CAR-T對B細胞淋巴瘤來進行治療，雖然治療結(jié)果不太理想，但這一臨床實驗的關(guān)鍵在于證實了以表達CD20的B細胞作為靶點的CAR-T治療是相對安全的。隨后，在2010年NCI報道了一例B細胞淋巴瘤治療成功的病例，利用針對CD19的CAR-T，病人的淋巴瘤得到控制，正常B細胞也被清除，血清Ig顯著降低，為CAR-T治療B細胞來源的淋巴瘤的有效性提供了理論和實際的支持。在2011年，美國賓夕法尼亞大學(xué)的的Carl?June博士領(lǐng)導(dǎo)的團隊將特異性識別CD19的CAR-T用于B細胞來源的慢性淋巴細胞白血病的治療，顯示了“治愈”的療效，隨后在復(fù)發(fā)難治性急性淋巴細胞白血病展開臨床實驗，也取得了良好的療效。由于這一突破性的進展以及其他免疫調(diào)控手段的發(fā)展，Science雜志將腫瘤免疫治療評為了2013年科技突破進展的第一名。這一成功在世界各國引起了廣泛的影響，各國開始大量開展基于CAR-T的科學(xué)研究和腫瘤治療的臨床試驗。

CAR的結(jié)構(gòu)由胞外抗原識別結(jié)構(gòu)域，胞外鉸鏈區(qū)，跨膜區(qū)和胞內(nèi)的信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域組成。胞外的抗原識別域通常是由單鏈抗體組成，特異性識別腫瘤細胞膜表面分子，也可以是某些腫瘤特異抗原的配體或受體等。胞外鉸鏈區(qū)是一段用于隔開抗原識別域和跨膜區(qū)的空間結(jié)構(gòu)，其目的是為了提供合適的空間位置，使得胞外抗原識別域能夠在識別抗原前后維持正確的結(jié)構(gòu)并傳導(dǎo)胞內(nèi)信號。跨膜區(qū)是為了保證CAR分子在膜表面定位的結(jié)構(gòu)域。胞內(nèi)信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域是介導(dǎo)CAR信號傳導(dǎo)的關(guān)鍵部分，通常是一個或幾個第一信號(TCR和MHC-I-peptide復(fù)合物識別)，第二信號(共刺激受體和共刺激配體識別)的組合。第一代CAR只含有第一信號，第二代CAR有一個第一信號和一個第二信號，第三代CAR有一個第一信號和兩個第二信號結(jié)構(gòu)域。雖然CAR-T在針對B細胞來源的白血病治療中獲得了巨大的成功，但是其相對較高的復(fù)發(fā)率以及對實體瘤的低有效率是當前的重要挑戰(zhàn)。因此發(fā)展新一代的高效CAR-T是目前臨床所急需的。除了第三代CAR-T，目前還有其他新的CAR-T設(shè)計策略，即在第二代CAR-T的基礎(chǔ)上引入了新的獨立于CAR的調(diào)節(jié)分子，以進一步增強CAR-T的功能。