[發明專利]一種人ATP7b基因外顯子PCR擴增系統、檢測試劑盒及其應用的方法有效
| 申請號: | 201810619125.0 | 申請日: | 2018-06-15 |
| 公開(公告)號: | CN108841929B | 公開(公告)日: | 2022-03-11 |
| 發明(設計)人: | 彭朝敏;金云舟;周巍;陳林;李明陽;鄧淑燕 | 申請(專利權)人: | 上海五色石醫學技術有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/6858 | 分類號: | C12Q1/6858;C12Q1/6883 |
| 代理公司: | 上海上谷知識產權代理有限公司 31342 | 代理人: | 蔡繼清 |
| 地址: | 201407 上海市奉*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 atp7b 基因 外顯子 pcr 擴增 系統 檢測 試劑盒 及其 應用 方法 | ||
1.一種用于人ATP7b基因21個外顯子的PCR擴增系統,所述擴增系統由以下外顯子位點相對應的23對PCR擴增引物組成:
位點Exon1,相對應的引物序列為SEQ ID No.1和SEQ ID No.2;
位點Exon2-1,相對應的引物序列為SEQ ID No.3和SEQ ID No.4;
位點Exon2-2,相對應的引物序列為SEQ ID No.5和SEQ ID No.6;
位點Exon2-3,相對應的引物序列為SEQ ID No.7和SEQ ID No.8;
位點Exon3,相對應的引物序列為SEQ ID No.9和SEQ ID No.10;
位點Exon4,相對應的引物序列為SEQ ID No.11和SEQ ID No.12;
位點Exon5,相對應的引物序列為SEQ ID No.13和SEQ ID No.14;
位點Exon6,相對應的引物序列為SEQ ID No.15和SEQ ID No.16;
位點Exon7,相對應的引物序列為SEQ ID No.17和SEQ ID No.18;
位點Exon8,相對應的引物序列為SEQ ID No.19和SEQ ID No.20;
位點Exon9,相對應的引物序列為SEQ ID No.21和SEQ ID No.22;
位點Exon10,相對應的引物序列為SEQ ID No.23和SEQ ID No.24;
位點Exon11,相對應的引物序列為SEQ ID No.25和SEQ ID No.26;
位點Exon12,相對應的引物序列為SEQ ID No.27和SEQ ID No.28;
位點Exon13,相對應的引物序列為SEQ ID No.29和SEQ ID No.30;
位點Exon14,相對應的引物序列為SEQ ID No.31和SEQ ID No.32;
位點Exon15,相對應的引物序列為SEQ ID No.33和SEQ ID No.34;
位點Exon16,相對應的引物序列為SEQ ID No.35和SEQ ID No.36;
位點Exon17,相對應的引物序列為SEQ ID No.37和SEQ ID No.38;
位點Exon18,相對應的引物序列為SEQ ID No.39和SEQ ID No.40;
位點Exon19,相對應的引物序列為SEQ ID No.41和SEQ ID No.42;
位點Exon20,相對應的引物序列為SEQ ID No.43和SEQ ID No.44;
位點Exon21,相對應的引物序列為SEQ ID No.45和SEQ ID No.46。
2.如權利要求1所述的PCR擴增系統,其特征在于,引物由SEQ ID No.1至SEQ ID No.46所示寡核苷酸序列的PCR擴增引物的干粉或溶液組成。
3.一種對人ATP7b基因21個外顯子檢測的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包含含有權利要求1所述PCR擴增系統的引物組合物容器和PCR反應母液容器;其中:
所述引物組合物容器包含序列為SEQ ID No.1至SEQ ID No.46所示的引物的貯存液,貯存液中各引物的濃度為相應引物工作液濃度的2~10倍;所述PCR反應母液容器內含有進行PCR反應的2~5倍反應濃度的PCR反應母液,PCR反應母液包含酶活為0.5~5U的DNA聚合酶、濃度為1~5mmol/L的鎂離子、濃度為40~400μmol/L的dNTP及濃度為20~100mmol/L的Tris-HCl緩沖液;
所述引物工作液濃度為50~400nmol/L。
4.權利要求3所述試劑盒在非診斷性進行人ATP7b基因21個外顯子檢測中的用途。
5.權利要求1所述PCR擴增系統在制備對人ATP7b基因21個外顯子檢測的試劑盒中的用途。
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