[發(fā)明專利]檢測(cè)ABCG8內(nèi)含子4突變的引物、方法和試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810618689.2
• 申請(qǐng)日: 2018-06-15
• 公開（公告）號(hào): CN108949952A
• 公開（公告）日: 2018-12-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 桑志高;吳鵬飛;王淑一
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 合肥艾迪康臨床檢驗(yàn)所有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 杭州千克知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33246
• 代理人: 黎雙華

1.檢測(cè)ABCG8內(nèi)含子4基因突變的引物，其特征在于，包括擴(kuò)增ABCG8基因內(nèi)含子4序列的引物，其堿基序列為：

ABCG8-intron4-F:TGTAAAACGACGGCCAGTCACCTCTCTAGGGGCTGGTC

ABCG8-intron4-R：AACAGCTATGACCATGCGGAAGGCAAGCTGAGTTGT。

2.如權(quán)利要求1所述的引物，其特征在于，還包括測(cè)序引物，其堿基序列為：

M13-F：TGTAAAACGACGGCCAGT

M13-R：AACAGCTATGACCATG。

3.如權(quán)利要求2所述的引物，其特征在于，所述ABCG8內(nèi)含子4基因突變包括12902T>C突變點(diǎn)。

4.檢測(cè)ABCG8內(nèi)含子4基因突變的引物的試劑盒，其特征在于，包括：

(i)血液DNA抽提試劑；

(ii)檢測(cè)體系PCR擴(kuò)增反應(yīng)液；擴(kuò)增ABCG8基因內(nèi)含子4的引物的堿基序列為：

ABCG8-intron4-F:TGTAAAACGACGGCCAGTCACCTCTCTAGGGGCTGGTC

ABCG8-intron4-R：AACAGCTATGACCATGCGGAAGGCAAGCTGAGTTGT；

(iii)測(cè)序體系試劑；測(cè)序引物的堿基序列為：

M13-F：TGTAAAACGACGGCCAGT

M13-R：AACAGCTATGACCATG。

5.檢測(cè)ABCG8內(nèi)含子4基因突變的方法，包括以下步驟：

(1)抽提血液中的基因組DNA；

(2)用PCR擴(kuò)增步驟1中提取的DNA；其中擴(kuò)增ABCG8基因內(nèi)含子4的引物的堿基序列為：

ABCG8-intron4-F:TGTAAAACGACGGCCAGTCACCTCTCTAGGGGCTGGTC

ABCG8-intron4-R：AACAGCTATGACCATGCGGAAGGCAAGCTGAGTTGT；

(3)對(duì)步驟2中的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序；測(cè)序引物的堿基序列為：

M13-F：TGTAAAACGACGGCCAGT

M13-R：AACAGCTATGACCATG；

(4)對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行判斷，確定ABCG8內(nèi)含子4基因位點(diǎn)是否發(fā)生突變。

6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述突變?yōu)橹参锕檀佳YABCG8內(nèi)含子4的12902T>C突變。