[發(fā)明專利]一種可提高產(chǎn)量的生產(chǎn)萬古霉素的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810618629.0
• 申請(qǐng)日: 2014-11-26
• 公開（公告）號(hào): CN108728505B
• 公開（公告）日: 2021-10-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 魯智林;陳堅(jiān)超;石敏敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 麗珠集團(tuán)福州福興醫(yī)藥有限公司
• 主分類號(hào): C12P21/02
• 分類號(hào): C12P21/02
• 代理公司: 福州市博深專利事務(wù)所(普通合伙) 35214
• 代理人: 林志崢;柯玉珊

本發(fā)明提供一種可提高萬古霉素產(chǎn)量的萬古霉素的補(bǔ)料培養(yǎng)基及生產(chǎn)萬古霉素的方法，所述補(bǔ)料培養(yǎng)基包括碳源、氮源和pH調(diào)節(jié)劑中的一種或幾種，所述碳源包括甘油、淀粉、燕麥粉、葡萄糖、乳糖、淀粉中的一種或幾種，所述氮源包括黃豆粉、棉籽精粉、玉米蛋白粉中的一種或幾種，所述PH調(diào)節(jié)劑包括磷酸和氨水中的一種或兩種；所述方法包括在發(fā)酵過程中向發(fā)酵培養(yǎng)基添加補(bǔ)料培養(yǎng)基，所述補(bǔ)料培養(yǎng)基包括碳源、氮源和pH調(diào)節(jié)劑中的一種或幾種。本發(fā)明的有益效果在于，發(fā)酵過程中向發(fā)酵培養(yǎng)基中添加所述補(bǔ)料培養(yǎng)基，降低抑制產(chǎn)生萬古霉素次生代謝途徑的因素，可提高萬古霉素發(fā)酵的產(chǎn)量。

本案是以申請(qǐng)日為2014年11月26日，申請(qǐng)?zhí)枮?01410696241.4，名稱為“一種萬古霉素的補(bǔ)料培養(yǎng)基及生產(chǎn)萬古霉素的方法”的發(fā)明專利為母案而進(jìn)行的分案申請(qǐng)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及抗生素發(fā)酵領(lǐng)域，具體地說是一種萬古霉素的補(bǔ)料培養(yǎng)基及生產(chǎn)萬古霉素的方法。

背景技術(shù)

萬古霉素是東方諾卡氏菌在控制發(fā)酵條件下產(chǎn)生的一種兩性糖肽類抗生素，其化學(xué)式為C₆₆H₇₅C_l2N₉O₂₄，分子量為1486。現(xiàn)有技術(shù)中可通過微生物Amycolatopis orientalis發(fā)酵制備萬古霉素。萬古霉素是目前治療盤尼西林耐藥菌感染者和β-內(nèi)酰胺類抗生素過敏癥的首選藥，被國際抗生素專家譽(yù)為“人類對(duì)付頑固性耐藥菌株的最后一道防線”。萬古霉素作為一種療效獨(dú)特的抗生素在臨床應(yīng)用上具有日益重要的地位。

萬古霉素是發(fā)酵產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，特點(diǎn)是一般不在細(xì)胞迅速生長期產(chǎn)生，而是在菌體生長到達(dá)相對(duì)靜止期才產(chǎn)生。在細(xì)胞生長階段，負(fù)責(zé)次級(jí)代謝產(chǎn)物合成的酶處于抑制狀態(tài)，因而不產(chǎn)生萬古霉素，一旦生長接近尾聲，這些酶便開始被激活或被合成，開始合成萬古霉素。影響次級(jí)代謝產(chǎn)物的因素非常復(fù)雜，例如葡萄糖效應(yīng)和毒蛋白效應(yīng)都會(huì)抑制萬古霉素的產(chǎn)量，篩選更加合適的培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基組分等，提高萬古霉素的產(chǎn)量是企業(yè)不斷追求的。在我國，萬古霉素雖已實(shí)現(xiàn)國內(nèi)的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，但發(fā)酵的產(chǎn)量仍有待提高。

補(bǔ)料發(fā)酵雖然在發(fā)酵行業(yè)廣泛使用，但是由于產(chǎn)品的差異導(dǎo)致菌種不同，或者即使同菌株經(jīng)過不同的公司篩選程序后選育出的菌株特性也會(huì)產(chǎn)生差異，菌種或菌株的差異導(dǎo)致發(fā)酵生產(chǎn)過程中，各生產(chǎn)條件如通氣量、碳源、氮源、發(fā)酵時(shí)間等的差異，不同產(chǎn)品或者不同公司的補(bǔ)料發(fā)酵工藝在推廣的過程中存在眾多技術(shù)難題。基于這些原因，使得即使補(bǔ)料發(fā)酵在青霉素或者維生素發(fā)酵行業(yè)已經(jīng)應(yīng)用，在萬古霉素發(fā)酵生產(chǎn)中并沒有公開成功的案例。

對(duì)于萬古霉素補(bǔ)料發(fā)酵，以下問題亟需得到解決：補(bǔ)料的時(shí)機(jī)(發(fā)酵物料發(fā)酵到什么程度補(bǔ))、補(bǔ)料過程如何防染菌、補(bǔ)料的比例(所補(bǔ)營養(yǎng)成分占發(fā)酵液的百分之幾)等。補(bǔ)料時(shí)機(jī)的選擇尤為重要，需要能夠降低葡萄糖效應(yīng)的同時(shí)保證碳源的供應(yīng)；另外還需確定添加的營養(yǎng)成分種類、各營養(yǎng)成分各自的補(bǔ)料時(shí)機(jī)、補(bǔ)料的比例等。眾多技術(shù)問題給萬古霉素補(bǔ)料發(fā)酵帶來障礙。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：提供一種可提高萬古霉素產(chǎn)量的萬古霉素補(bǔ)料培養(yǎng)基及生產(chǎn)萬古霉素的方法。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：一種萬古霉素的補(bǔ)料培養(yǎng)基，包括碳源、氮源和pH調(diào)節(jié)劑中的一種或幾種，所述碳源包括甘油、淀粉、燕麥粉、葡萄糖、乳糖、淀粉中的一種或幾種，所述氮源包括黃豆粉、棉籽精粉、玉米蛋白粉中的一種或幾種，所述PH調(diào)節(jié)劑包括磷酸和氨水中的一種或兩種。

本發(fā)明的另一技術(shù)方案為：一種生產(chǎn)萬古霉素的方法，包括在發(fā)酵過程中向發(fā)酵培養(yǎng)基添加補(bǔ)料培養(yǎng)基，所述補(bǔ)料培養(yǎng)基包括碳源、氮源和pH調(diào)節(jié)劑中的一種或幾種。

本發(fā)明的有益效果在于：發(fā)酵過程中用補(bǔ)料培養(yǎng)基向發(fā)酵培養(yǎng)基補(bǔ)料，降低抑制產(chǎn)生萬古霉素次生代謝途徑的因素，可提高萬古霉素發(fā)酵的產(chǎn)量。

具體實(shí)施方式

為詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容、所實(shí)現(xiàn)目的及效果，以下結(jié)合實(shí)施方式予以說明。