[發明專利]一種產量顯著提高的生產萬古霉素的方法

有效

• 申請號: 201810618501.4
• 申請日: 2014-11-26
• 公開（公告）號: CN108796013B
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 魯智林;陳堅超;石敏敏
• 申請（專利權）人: 麗珠集團福州福興醫藥有限公司
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02
• 代理公司: 福州市博深專利事務所(普通合伙) 35214
• 代理人: 林志崢;柯玉珊

本發明提供一種可提高萬古霉素產量的萬古霉素的補料培養基及生產萬古霉素的方法，所述補料培養基包括碳源、氮源和pH調節劑中的一種或幾種，所述碳源包括甘油、淀粉、燕麥粉、葡萄糖、乳糖、淀粉中的一種或幾種，所述氮源包括黃豆粉、棉籽精粉、玉米蛋白粉中的一種或幾種，所述PH調節劑包括磷酸和氨水中的一種或兩種；所述方法包括在發酵過程中向發酵培養基添加補料培養基，所述補料培養基包括碳源、氮源和pH調節劑中的一種或幾種。本發明的有益效果在于，發酵過程中向發酵培養基中添加所述補料培養基，降低抑制產生萬古霉素次生代謝途徑的因素，可提高萬古霉素發酵的產量。

本案是以申請日為2014年11月26日，申請號為201410696241.4，名稱為“一種萬古霉素的補料培養基及生產萬古霉素的方法”的發明專利為母案而進行的分案申請。

技術領域

本發明涉及抗生素發酵領域，具體地說是一種萬古霉素的補料培養基及生產萬古霉素的方法。

背景技術

萬古霉素是東方諾卡氏菌在控制發酵條件下產生的一種兩性糖肽類抗生素，其化學式為C₆₆H₇₅C_l2N₉O₂₄，分子量為1486。現有技術中可通過微生物Amycolatopis orientalis發酵制備萬古霉素。萬古霉素是目前治療盤尼西林耐藥菌感染者和β-內酰胺類抗生素過敏癥的首選藥，被國際抗生素專家譽為“人類對付頑固性耐藥菌株的最后一道防線”。萬古霉素作為一種療效獨特的抗生素在臨床應用上具有日益重要的地位。

萬古霉素是發酵產生的次生代謝產物，特點是一般不在細胞迅速生長期產生，而是在菌體生長到達相對靜止期才產生。在細胞生長階段，負責次級代謝產物合成的酶處于抑制狀態，因而不產生萬古霉素，一旦生長接近尾聲，這些酶便開始被激活或被合成，開始合成萬古霉素。影響次級代謝產物的因素非常復雜，例如葡萄糖效應和毒蛋白效應都會抑制萬古霉素的產量，篩選更加合適的培養條件和培養基組分等，提高萬古霉素的產量是企業不斷追求的。在我國，萬古霉素雖已實現國內的產業化生產，但發酵的產量仍有待提高。

補料發酵雖然在發酵行業廣泛使用，但是由于產品的差異導致菌種不同，或者即使同菌株經過不同的公司篩選程序后選育出的菌株特性也會產生差異，菌種或菌株的差異導致發酵生產過程中，各生產條件如通氣量、碳源、氮源、發酵時間等的差異，不同產品或者不同公司的補料發酵工藝在推廣的過程中存在眾多技術難題。基于這些原因，使得即使補料發酵在青霉素或者維生素發酵行業已經應用，在萬古霉素發酵生產中并沒有公開成功的案例。

對于萬古霉素補料發酵，以下問題亟需得到解決：補料的時機(發酵物料發酵到什么程度補)、補料過程如何防染菌、補料的比例(所補營養成分占發酵液的百分之幾)等。補料時機的選擇尤為重要，需要能夠降低葡萄糖效應的同時保證碳源的供應；另外還需確定添加的營養成分種類、各營養成分各自的補料時機、補料的比例等。眾多技術問題給萬古霉素補料發酵帶來障礙。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是：提供一種可提高萬古霉素產量的萬古霉素補料培養基及生產萬古霉素的方法。

為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案為：一種萬古霉素的補料培養基，包括碳源、氮源和pH調節劑中的一種或幾種，所述碳源包括甘油、淀粉、燕麥粉、葡萄糖、乳糖、淀粉中的一種或幾種，所述氮源包括黃豆粉、棉籽精粉、玉米蛋白粉中的一種或幾種，所述PH調節劑包括磷酸和氨水中的一種或兩種。

本發明的另一技術方案為：一種生產萬古霉素的方法，包括在發酵過程中向發酵培養基添加補料培養基，所述補料培養基包括碳源、氮源和pH調節劑中的一種或幾種。

本發明的有益效果在于：發酵過程中用補料培養基向發酵培養基補料，降低抑制產生萬古霉素次生代謝途徑的因素，可提高萬古霉素發酵的產量。

具體實施方式

為詳細說明本發明的技術內容、所實現目的及效果，以下結合實施方式予以說明。