[發明專利]一種外周血中氯化琥珀膽堿的檢測方法

有效

• 申請號: 201810618198.8
• 申請日: 2018-06-15
• 公開（公告）號: CN108663456B
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 姜榮;陳林;陳志武;解啟文;孟剛;盛潔;萬陽
• 申請（專利權）人: 安徽醫科大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 合肥匯融專利代理有限公司 34141
• 代理人: 趙宗海

本發明提供一種外周血中氯化琥珀膽堿的檢測方法，涉及藥物檢測技術領域。所述檢測方法主要是通過圓二色譜法與紅外光譜法合用檢測的方式來檢測外周血樣本白蛋白中是否含有氯化琥珀膽堿；本發明克服了人體內氯化琥珀膽堿成分檢測難以定性的問題，通過本發明測試方法所得的譜圖特征性變化，能準確鑒別血清中是否含有氯化琥珀膽堿，此方法準確性高、效率好，為法醫學檢測提供良好的鑒定手段。

技術領域

本發明涉及藥物檢測技術領域，具體涉及一種外周血中氯化琥珀膽堿的檢測方法。

背景技術

琥珀膽堿(succinylcholine)，又名琥膽、司可林(scoline)，為國內常用的去極化型肌松劑，在臨床中是一種骨骼肌松弛藥，曾被國家列為B級有機劇毒物。此種藥物作用快，持續時間短，其肌松效能為筒箭毒堿的1.8倍。本藥靜注后氯化琥珀膽堿會和人體內的N₂膽堿受體競爭性的結合，阻斷神經沖動的傳遞，導致神經信號不能傳遞給肌肉，肌肉出現大面積的麻痹、松弛，首先引起短暫的肌束震顫，一分鐘內即出現肌松作用，通常從頸部肌肉開始，逐漸波及肩胛，腹部和四肢。2分鐘時作用達高峰，通常于5分鐘內作用消失，如需長時間的肌松作用可以采用持續靜脈滴注達到。本藥去神經節阻斷作用，常用劑量不引起組胺釋放，但大劑量仍可能使組胺明顯釋放，而出現支氣管痙攣、呼吸肌麻痹、血壓下降或過敏性休克，也可致心率減慢及心律失常。臨床常用于全麻下氣管內插管，也用于內窺鏡的檢查，破傷風或電休克驚厥等，醫學研究表明氯化琥珀膽堿注射量達到0.02克就能致死。

由于其進入體內能迅速被血中丁酰膽堿酯酶水解，分解為琥珀酰單膽堿、琥珀酸和膽堿等物質，原型藥物難以被常規方法檢測到，這一特性近些年來被不法分子利用，將氯化琥珀膽堿制成“毒針”、“毒飛鏢”等具有傷害性的武器，由其造成的刑事案件給社會帶來了很大的危害，給法醫對此類案件的檢測定性工作帶來了困難。目前常用的氯化琥珀膽堿膽堿檢測方法為LC-MS/MS法，用于檢測人體組織和外周血中的痕量氯化琥珀膽堿及其代謝產物，作為定性和定量的依據，但存在著檢測限高，回收率低的問題。

發明內容

針對現有技術不足，本發明提供一種外周血中氯化琥珀膽堿的檢測方法，克服了人體內氯化琥珀膽堿成分檢測難以定性的問題，通過本發明測試方法所得的譜圖特征性變化，能準確鑒別血清中是否含有氯化琥珀膽堿，此方法準確性高、效率好，為法醫學檢測提供良好的鑒定手段。

為實現以上目的，本發明的技術方案通過以下技術方案予以實現：

一種外周血中氯化琥珀膽堿的檢測方法，所述檢測方法包括以下步驟：

(1)采用緩沖液配置白蛋白(HSA)儲備液，恒溫保存；將標準品氯化琥珀膽堿溶于去離子水中，制得氯化琥珀膽堿溶液；

(2)將配置好的HSA儲備液與疑似中毒者白蛋白標本采用圓二色譜儀對分別測定二者CD圖譜，并記錄；

(3)將HSA儲備液稀釋，采用圓二色譜儀檢測測定200～300nm波長范圍內的CD圖譜，記錄；將稀釋后的HSA儲備液與氯化琥珀膽堿相互作用后，測定其200～300nm波長范圍內的CD圖譜，記錄；

(4)比較HSA與氯化琥珀膽堿相互作用前后的α螺旋含量的改變，采用公式：α-helix％＝{-([θ]208-4000)/(33000-4000)}×100計算，并與疑似中毒者白蛋白標本進行比對；

(5)使用光譜儀進行紅外光譜測定，在分辨率為4cm^-1條件下掃描多次，收集水蒸氣的譜圖，使用數據處理軟件OMNIC 52對所收集到的水蒸氣譜圖自動進行水汽校正；

(6)分別取少量緩沖液、HSA、氯化琥珀膽堿、氯化琥珀膽堿-HSA溶液均勻滴在ZnSe晶片上，掃描后收集樣品光譜；