[發明專利]用于控制昆蟲侵襲的核苷酸序列及其方法

有效

• 申請號: 201810618040.0
• 申請日: 2018-06-15
• 公開（公告）號: CN110669761B
• 公開（公告）日: 2022-11-04
• 發明（設計）人: 張愛紅;丁德榮;陶青;李曉嬌
• 申請（專利權）人: 北京大北農生物技術有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A01N57/16;A01P7/04;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46;A01H6/54
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1.一種分離的多核苷酸序列，其中所述多核苷酸選自：

(a)SEQ ID NO:1所示的多核苷酸序列；

(b)SEQ ID NO:1的至少121個連續核苷酸的多核苷酸序列，其中雙斑螢葉甲害蟲攝取包含與所述多核苷酸序列互補的至少一條鏈的雙鏈RNA，抑制所述雙斑螢葉甲害蟲的生長；

(c)SEQ ID NO:3至SEQ ID NO:6所示的任一多核苷酸序列；和

(d)(a)-(c)任一項限定的多核苷酸序列的完全互補序列。

2.根據權利要求1所述多核苷酸序列，其特征在于，所述多核苷酸序列還包括權利要求1所述多核苷酸序列的互補序列。

3.根據權利要求1或2所述多核苷酸序列，其特征在于，所述多核苷酸序列還包括間隔序列。

4.根據權利要求3所述多核苷酸序列，其特征在于，所述間隔序列為SEQ ID NO:9。

5.一種表達盒，其特征在于，包含在有效連接的調控序列調控下的權利要求1-4任一項所述多核苷酸序列。

6.一種包含權利要求1-4任一項所述多核苷酸序列或權利要求5所述表達盒的重組載體。

7.一種權利要求1-4任一項所述多核苷酸序列用于干擾雙斑螢葉甲害蟲靶標序列表達或抑制雙斑螢葉甲害蟲生長的用途。

8.一種干擾核糖核酸序列，其特征在于，所述干擾核糖核酸序列在被雙斑螢葉甲害蟲攝入后起到下調所述雙斑螢葉甲害蟲中至少一種靶標基因表達的作用，其中所述干擾核糖核酸序列包含至少一個沉默元件，其中所述沉默元件包含退火的互補鏈的一個雙鏈RNA區域，其中所述雙鏈RNA的一條鏈包含所述靶標基因內的一個靶標序列的完全互補序列或由其組成，所述靶標基因為SEQ ID NO:1所示的多核苷酸序列，其中所述靶標序列選自：

(a)SEQ ID NO:1的至少121個連續核苷酸的多核苷酸序列，其中雙斑螢葉甲害蟲攝取包含與所述多核苷酸序列互補的至少一條鏈的雙鏈RNA，抑制所述雙斑螢葉甲害蟲的生長；和

(b)SEQ ID NO:3至SEQ ID NO:6所示的任一多核苷酸序列。

9.根據權利要求8所述干擾核糖核酸序列，其特征在于，所述干擾核糖核酸序列包含至少兩個沉默元件，每一個所述沉默元件包含與所述靶標基因內的一個靶標序列至少部分地互補的一個核苷酸序列或由其組成。

10.根據權利要求9所述干擾核糖核酸序列，其特征在于，所述沉默元件各自包含與一個不同的靶標序列互補的一個不同的核苷酸序列或由其組成。

11.根據權利要求10所述干擾核糖核酸序列，其特征在于，所述不同的靶標序列來源于單一的所述靶標基因或來源于與所述靶標基因不同的靶標基因。

12.根據權利要求11所述干擾核糖核酸序列，其特征在于，所述與所述靶標基因不同的靶標基因來源于雙斑螢葉甲或不同的鞘翅目昆蟲害蟲。

13.根據權利要求8-12任一項所述干擾核糖核酸序列，其特征在于，所述干擾核糖核酸序列還包括間隔序列。

14.根據權利要求13所述干擾核糖核酸序列，其特征在于，所述間隔序列為SEQ ID NO:9。

15.一種控制雙斑螢葉甲害蟲侵襲的組合物，其特征在于，包含至少一種權利要求8-14任一項所述干擾核糖核酸序列和至少一種合適的載體、賦形劑或稀釋劑。

16.根據權利要求15所述控制雙斑螢葉甲害蟲侵襲的組合物，其特征在于，所述組合物包含一種表達或能夠表達所述干擾核糖核酸序列的宿主細胞。