[發明專利]代謝標志物在制備腎病綜合征病變進程診斷鑒別試劑中的應用

有效

• 申請號: 201810617332.2
• 申請日: 2018-06-15
• 公開（公告）號: CN108918571B
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 李愛平;張王寧;李震宇;秦雪梅;楊柳;張麗增
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: G01N24/08
• 分類號: G01N24/08;G01N33/68
• 代理公司: 太原晉科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 14110
• 代理人: 任林芳

本發明屬于腎病綜合征標志物篩選鑒定技術領域，為了解決現有技術不能確定腎病綜合征病變進程的缺點，提供了一種代謝標志物在制備腎病綜合征病變進程診斷鑒別試劑中的應用。所述代謝標志物為亮氨酸、2?羥基丁酸、N?乙酰?谷氨酸和甲硫氨酸的組合。所述代謝標志物源于尿液。所述代謝標記物在制備腎病綜合征病變進程診斷鑒別試劑中的用途。通過機體終端產物尿液中內源性生物標志物含量的動態變化過程，篩選可以反映腎病綜合征病變進程的生物標志物，為解決現有腎病綜合征病變進程尚無評價方法的缺點。最終依據確定的進展性標志物對腎病綜合征模型早期病變及病程進行評價。本發明用于動態代謝物鑒定領域，從而針對性的評價腎病綜合征的發病進程。

技術領域

本發明屬于腎病綜合征標志物篩選鑒定技術領域，具體涉及一種代謝標志物在制備腎病綜合征病變進程診斷鑒別試劑中的應用。利用阿霉素腎病模型和NMR技術分析獲得的與腎病綜合征病變進程相關的進展性標志物及其在制備腎病綜合征病變進程診斷鑒別試劑中的用途。

背景技術

腎病綜合征是由于各種病因導致的腎小球濾過膜通透性發生改變的一個癥候群，大量蛋白尿是其主要特點和誘因，且腎病綜合征為兒童多發難治性疾病，發病率髙達2~10/100000，為僅次于急性腎小球腎炎的第二大腎臟疾病，嚴重影響人類健康。

阿霉素誘導的大鼠腎病模型是公認的模擬人類腎臟疾病的動物模型，其臨床表現接近腎病綜合征的特征。實驗中可依據24 h尿蛋白定量判斷腎病綜合征模型復制成功與否，而腎病的病理類型及病變程度主要依據腎組織病理學檢查，不僅主觀性強且耗時耗力，目前尚無腎病綜合征病變進程動態評價方法，因而需要建立一種整體非入侵、快速、高靈敏度、專屬性好的可用于早期腎病診斷以及動態反映疾病的病程的方法。

代謝組學以其不斷增加的覆蓋范圍及其內在的高通量能力在許多領域中得到應用，如疾病診斷和治療，藥物毒性研究，生物標志物發現以及疾病機制探索等。尿液作為腎臟的終端產物，在反映腎臟狀態方面具有很大優勢，且可以無創傷的獲得大量樣本。

發明內容

本發明為了解決現有技術不能確定腎病綜合征病變進程的缺點，提供了一種代謝標志物在制備腎病綜合征病變進程診斷鑒別試劑中的應用。

本發明由如下技術方案實現的：一種代謝標志物在制備腎病綜合征病變進程診斷鑒別試劑中的應用，所述代謝標志物為亮氨酸、2-羥基丁酸、N-乙酰-谷氨酸和甲硫氨酸的組合。

所述代謝標志物源于尿液。所述代謝標記物在制備腎病綜合征病變進程診斷鑒別試劑中的用途。

所述代謝標記物的篩選方法為：

（1）阿霉素腎病模型的復制與傳統評價：將大鼠隨機分為空白對照組與阿霉素腎病模型組，阿霉素腎病模型組采用尾靜脈注射阿霉素進行誘導，建立阿霉素腎病模型；利用腎組織病理切片與尿蛋白定量水平進行阿霉素腎病模型評價；

（2）差異代謝物的尋找：在不同時間階段收集各組大鼠的尿液樣品，并分裝成2份備用；對其中1份尿液進行核磁共振即Nuclear Magnetic Resonance，NMR分析，歸屬出代謝物；對另1份進行尿蛋白定量測定；核磁圖譜轉換為數據矩陣，導入到SIMCA-P軟件進行差異代謝物尋找；

（3）計算各差異代謝物的變化率，并結合線性回歸分析、主成分分析、累計方差貢獻率分析、相關分析方法篩選、確定腎病綜合征病變進程的進展性標志物；

（4）依據ROC曲線下面積，評估進展性標志物的診斷準確性，進展性標志物的曲線下面積大于0.9的標志物，作為反映腎病綜合征病變進程的代謝標志物。