[發明專利]測定復方制劑中靈芝三萜類成分含量的方法

有效

• 申請號: 201810617111.5
• 申請日: 2018-06-15
• 公開（公告）號: CN108802255B
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發明（設計）人: 李曄;周巖飛;黃樣增;姚渭溪;吳長輝
• 申請（專利權）人: 福建仙芝樓生物科技有限公司;仙芝科技（福建）股份有限公司
• 主分類號: G01N30/89
• 分類號: G01N30/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種測定復方制劑中靈芝三萜類成分含量的方法，其特征在于：

供試品溶液的制作：對于富含非極性成分的樣品：稱取相當于靈芝生藥量200 mg重量的復方制劑，100 ml正己烷提取，離心棄上清；渣用100 ml乙酸乙酯提取，離心取上清，濃縮蒸干，固體用水超聲混懸成懸濁液，加入活化后的HZ816固相萃取小柱上樣，上樣后用5 ml水洗柱，棄去，用4 ml甲醇洗脫，洗脫液用甲醇定容5 ml，過0.45μm濾膜，即得供試品溶液；對于富含極性成分的樣品：稱取相當于靈芝生藥量200 mg重量的復方制劑，用100 ml乙酸乙酯提取，離心取上清，濃縮蒸干，固體用水超聲混懸成懸濁液，加入活化HZ816固相萃取小柱上樣，上樣后用5 ml水洗柱，棄去，用4 ml甲醇洗脫，洗脫液用甲醇定容5ml，過0.45μm濾膜，即得供試品溶液；對于富含非極性和極性成分的樣品：稱取相當于靈芝生藥量200 mg重量的復方制劑，用100 ml乙酸乙酯提取，離心取上清，濃縮蒸干，固體加入正己烷超聲混懸，離心棄上清，沉淀用水超聲混懸成懸濁液，加入活化的HZ816固相萃取小柱上樣，上樣后用5ml水洗柱，棄去，用4 ml甲醇洗脫，洗脫液用甲醇定容5 ml，過0.45 μm濾膜，即得供試品溶液；

使用梯度變化的乙腈、甲醇和水溶液作為高效液相色譜流動相，對供試品溶液進行檢測；色譜柱為Agilent Eclipse XDB-C18 ，150 mm×4.6 mm，5 μm；梯度變化見下表：

流動相梯度變化表

以靈芝酸A作為對照品測定樣品中靈芝三萜類成分含量，所述的靈芝三萜類成分為靈芝酸A、靈芝酸C2、靈芝酸G、靈芝酸B、靈芝酸H、靈芝酸D和靈芝酸F。

2.根據權利要求1中所述的一種測定復方制劑中靈芝三萜類成分含量的方法，其特征在于：柱溫：40 ℃，檢測波長：254 nm，流速：1.0 ml/min，檢測時間：45 min，供試品溶液和靈芝酸A對照品溶液進樣量為20μL，以靈芝酸A為對照品測定制劑中的靈芝酸A含量，同時以相對于靈芝酸A的保留時間鑒別靈芝酸C2、靈芝酸G、靈芝酸B、靈芝酸H、靈芝酸D、靈芝酸F共6種靈芝三萜類成分，并以相對校正因子進行換算測定其含量。