[發(fā)明專利]一種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素高選擇性固相微萃取探針及其制備方法和應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810608522.8
• 申請日: 2018-06-13
• 公開（公告）號: CN109078627A
• 公開（公告）日: 2018-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊運(yùn)云;劉耀慧;郭鵬然;楊秋霞
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東省測試分析研究所（中國廣州分析測試中心）
• 主分類號: B01J20/286
• 分類號: B01J20/286;B01J20/30;B01D15/10;G01N30/06
• 代理公司: 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001
• 代理人: 朱雙;莫瑤江

本發(fā)明公開了一種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素高選擇性固相微萃取探針及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明以羅紅霉素為模板分子，通過將分子印跡材料與表面富含羥基的固體基質(zhì)進(jìn)行硅烷化反應(yīng)，將分子印跡材料鍵合至固體基質(zhì)表面制備固相微萃取探針。該固相微萃取探針可直接對多種復(fù)雜基質(zhì)中的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素進(jìn)行高選擇性和高富集能力萃取。萃取后的固相微萃取探針可在常壓敞開的條件下，直接對探針中富集的化合物進(jìn)行電噴霧質(zhì)譜分析，具有理想的靈敏度和重現(xiàn)性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素高選擇性固相微萃取探針及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

大環(huán)內(nèi)酯類抗生素(Macrolide antibiotics，MALs)包括紅霉素、螺旋霉素、克拉霉素、羅紅霉素、交沙霉素、阿奇霉素等，其共同特點(diǎn)是分子內(nèi)具有大環(huán)結(jié)構(gòu)，同時(shí)兼具內(nèi)酯結(jié)構(gòu)。該類抗生素抗菌譜廣、吸收后在體內(nèi)分布廣、組織濃度高、且半衰期長，較容易在動(dòng)物性食品中以原形或其代謝產(chǎn)物的形式蓄積、貯存下來。目前，大環(huán)內(nèi)酯類抗生素是應(yīng)用范圍較為廣泛，不僅在人類臨床醫(yī)學(xué)和畜禽養(yǎng)殖業(yè)中作為治療藥物被人們廣泛使用，而且還被越來越多地作為飼料添加劑。但是，使用不合理或過量的使用會(huì)在環(huán)境、動(dòng)物性食品中造成殘留，最后通過食物鏈進(jìn)入人體，危害人體的健康。

近年來，動(dòng)物源食品中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素殘留的分析檢測是公認(rèn)的熱點(diǎn)問題之一。高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜是常用的方法，然而，該方法前處理步驟繁瑣，耗時(shí)耗力，制約了分析檢測速度，另外一個(gè)分析難點(diǎn)是大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的紫外響應(yīng)極低，食品中的殘留量常常處于痕量水平，故常規(guī)的液相方法或分光光度法很難滿足檢測需求。因此，需合成選擇性好、富集倍數(shù)高的材料對痕量的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素進(jìn)行富集濃縮，降低基質(zhì)效應(yīng)來滿足檢測要求。

固相微萃取(SPME)技術(shù)將采樣、萃取、富集和進(jìn)樣4個(gè)步驟合于一體，將其與質(zhì)譜聯(lián)用，可簡單高效地為痕量組分進(jìn)行定性定量分析。該技術(shù)通過物理或化學(xué)合成方法，在固體基質(zhì)表面制備具有吸附萃取性能的涂層，從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)分析物高效分離、富集和濃縮。SPME具有樣品用量小、選擇性高等優(yōu)點(diǎn)，其涂層材料的性質(zhì)決定了萃取的容量、選擇性和靈敏度。常壓敞開式質(zhì)譜(Ambient MS)是近年來新興的一種無需或僅需很少樣品前處理，能夠在常壓敞開條件下直接對樣品中的目標(biāo)物進(jìn)行離子化的質(zhì)譜分析技術(shù)。對于復(fù)雜食品基體中的痕量目標(biāo)分析物而言，SPME與Ambient MS聯(lián)用是一種直接有效的分析技術(shù)手段，可大幅度提高分析靈敏度、并減少基體效應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)復(fù)雜食品體系中痕量有害物質(zhì)殘留的直接、快速、準(zhǔn)確分析。基于以上技術(shù)優(yōu)點(diǎn)，發(fā)展一種可直接用于復(fù)雜食品介質(zhì)中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素高選擇性和高富集能力萃取、并可以實(shí)現(xiàn)常壓敞開電噴霧質(zhì)譜分析的新型固相微萃取探針將具有很大的潛力，也具有十分重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種新型的對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素具有高選擇性和高富集能力的固相微萃取探針及其制備方法和應(yīng)用。

本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素高選擇性固相微萃取探針的制備方法。

本發(fā)明的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素高選擇性固相微萃取探針的制備方法，包括以下步驟：

將γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷溶于有機(jī)溶劑中，將固體基質(zhì)置于該溶液中，無水條件下100-120℃反應(yīng)12-24h，反應(yīng)后用乙醇洗滌，除去未反應(yīng)的γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷，晾干制得表面改性的固體基質(zhì)；

其中，所述的γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷在有機(jī)溶劑中體積分?jǐn)?shù)為2％-5％，所述的有機(jī)溶劑為N,N-二甲基甲酰胺、甲苯或二氯甲烷；

將羅紅霉素溶于乙腈，再加入甲基丙烯酸聚合，在其中放入表面改性的固體基質(zhì)，再向混合溶液中加入二甲基丙烯酸乙二醇酯、偶氮二異丁腈，氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下50-100℃加熱聚合反應(yīng)6-24h，然后以體積分?jǐn)?shù)10％-20％乙酸的甲醇溶液為洗脫液采用索氏提取去除羅紅霉素，再用甲醇洗去殘留乙酸，得到大環(huán)內(nèi)酯類抗生素高選擇性固相微萃取探針；