[發(fā)明專(zhuān)利]一種抗蝎毒血清的提取方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810608190.3
• 申請(qǐng)日: 2018-06-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108752474A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-11-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳燕
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 天津市正江現(xiàn)代生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07K16/18
• 分類(lèi)號(hào): C07K16/18;C07K16/06;C07K1/34
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明是一種抗蝎毒血清的提取方法，包括以下步驟：第一步：選擇適齡、健康、無(wú)感染的動(dòng)物，提供優(yōu)良的衛(wèi)生條件，保持動(dòng)物良好的營(yíng)養(yǎng)狀況；第二步：免疫用的蝎毒抗原選用無(wú)菌的蝎毒或脫毒蝎毒，免疫抗原為配制稀釋成一系列一定濃度的蝎毒液；第三步：前期免疫，所述動(dòng)物在進(jìn)行蝎毒免疫前用濃縮破傷風(fēng)類(lèi)毒素進(jìn)行二次前期免疫,以防止后期蝎毒免疫引起的破傷風(fēng)。本發(fā)明提出的動(dòng)物抗蝎毒血清的提取方法，成本低，過(guò)程簡(jiǎn)單，不會(huì)引入其它雜質(zhì)，能穩(wěn)定提取高品質(zhì)的抗蝎毒血清。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其涉及一種抗蝎毒血清的提取方法。

背景技術(shù)

人被毒蝎蟄到后，毒液注入人的皮下組織，毒素通過(guò)淋巴液吸收，隨著血液循環(huán)會(huì)分布全身，會(huì)造成人體主要臟器官的損傷，若不及時(shí)救治，嚴(yán)重者會(huì)導(dǎo)致死亡，抗蝎毒血清中含有特異性抗體，與相應(yīng)的毒蝎抗原結(jié)合，會(huì)產(chǎn)生無(wú)毒性的抗原抗體復(fù)合物，起到中和毒素的作用。現(xiàn)階段，我國(guó)的抗蝎毒血清生產(chǎn)廠家較少，純度不高，收率也較低，不能滿足市場(chǎng)的需求。

為此，設(shè)計(jì)一種抗蝎毒血清的提取方法，解決以上問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明為克服以上不足，提供一種抗蝎毒血清的提取方法，包括以下步驟：

第一步：選擇適齡、健康、無(wú)感染的動(dòng)物，提供優(yōu)良的衛(wèi)生條件，保持動(dòng)物良好的營(yíng)養(yǎng)狀況；

第二步：免疫用的蝎毒抗原選用無(wú)菌的蝎毒或脫毒蝎毒，免疫抗原為配制稀釋成一系列一定濃度的蝎毒液；

第三步：前期免疫，所述動(dòng)物在進(jìn)行蝎毒免疫前用濃縮破傷風(fēng)類(lèi)毒素進(jìn)行二次前期免疫,以防止后期蝎毒免疫引起的破傷風(fēng)；

第四步：初次免疫蝎毒抗原0.1～0.5mg，加佐劑皮下注射，3周后，第二次免疫劑量同上，加佐劑皮下注射，5～7天后，檢測(cè)其抗體效價(jià)，當(dāng)有明顯抗體應(yīng)答反應(yīng)后進(jìn)行超免疫，蝎毒抗原量為0.5～5mg，靜脈注射；

第五步：在末次免疫的7～10天后，對(duì)所述動(dòng)物采集血樣，檢測(cè)其抗體效價(jià)，抗體滴度達(dá)到要求后，選擇上午在動(dòng)物空腹時(shí)用無(wú)菌取血器械抽取動(dòng)物的動(dòng)脈血液，加入原血量體積10％抗凝劑，攪拌使抗凝劑混合均勻；

第六步：將所述血液置于消毒滅菌后的離心管中在4℃下以2500rpm轉(zhuǎn)速離心10～15min，取上清于滅菌袋中，加入凝血酶，攪拌均勻，20～37℃條件下溫敷0.5～2h；

第七步：使用消毒滅菌后的離心管以8000～12000rpm轉(zhuǎn)速離心10～15min，取上清即為抗血清，置于滅菌袋中；

第八步：采用膜過(guò)濾法去除抗血清中的病毒，γ-射線輻照法進(jìn)行病毒滅活；

第九步：分離的抗蝎毒血清加防腐劑經(jīng)檢驗(yàn)合格后分裝和低溫保存。

進(jìn)一步，第一步中所述動(dòng)物為4-5歲的動(dòng)物。

進(jìn)一步，第一步中所述動(dòng)物為小白鼠。

進(jìn)一步，第三步中所述抗原濃度為0.1mg/L及1mg/L。

進(jìn)一步，第三步中所述佐劑為弗氏完全佐劑。

進(jìn)一步，第四步中所述抗凝劑為4％的檸檬酸鈉。

進(jìn)一步，第七步中所述膜的孔徑為0.5um。

進(jìn)一步，第八步中所述低溫的溫度范圍是3～4℃。

本發(fā)明的有益效果為：

相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提出的動(dòng)物抗蝎毒血清的提取方法，成本低，過(guò)程簡(jiǎn)單，不會(huì)引入其它雜質(zhì)，能穩(wěn)定提取高品質(zhì)的抗蝎毒血清。

具體實(shí)施方式

以下將結(jié)合本發(fā)明的實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)敘述。