[發明專利]一種抗蝎毒血清的提取方法

在審

• 申請號: 201810608190.3
• 申請日: 2018-06-13
• 公開（公告）號: CN108752474A
• 公開（公告）日: 2018-11-06
• 發明（設計）人: 陳燕
• 申請（專利權）人: 天津市正江現代生物技術有限公司
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C07K16/06;C07K1/34
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種抗蝎毒血清的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

第一步：選擇適齡、健康、無感染的動物，提供優良的衛生條件，保持動物良好的營養狀況；

第二步：免疫用的蝎毒抗原選用無菌的蝎毒或脫毒蝎毒，免疫抗原為配制稀釋成一系列一定濃度的蝎毒液；

第三步：前期免疫，所述動物在進行蝎毒免疫前用濃縮破傷風類毒素進行二次前期免疫,以防止后期蝎毒免疫引起的破傷風；

第四步：初次免疫蝎毒抗原0.1～0.5mg，加佐劑皮下注射，3周后，第二次免疫劑量同上，加佐劑皮下注射，5～7天后，檢測其抗體效價，當有明顯抗體應答反應后進行超免疫，蝎毒抗原量為0.5～5mg，靜脈注射；

第五步：在末次免疫的7～10天后，對所述動物采集血樣，檢測其抗體效價，抗體滴度達到要求后，選擇上午在動物空腹時用無菌取血器械抽取動物的動脈血液，加入原血量體積10％抗凝劑，攪拌使抗凝劑混合均勻；

第六步：將所述血液置于消毒滅菌后的離心管中在4℃下以2500rpm轉速離心10～15min，取上清于滅菌袋中，加入凝血酶，攪拌均勻，20～37℃條件下溫敷0.5～2h；

第七步：使用消毒滅菌后的離心管以8000～12000rpm轉速離心10～15min，取上清即為抗血清，置于滅菌袋中；

第八步：采用膜過濾法去除抗血清中的病毒，γ-射線輻照法進行病毒滅活；

第九步：分離的抗蝎毒血清加防腐劑經檢驗合格后分裝和低溫保存。

2.根據權利要求1所述的一種抗蝎毒血清的提取方法，其特征在于，第一步中所述動物為4-5歲的動物。

3.根據權利要求2所述的一種抗蝎毒血清的提取方法，其特征在于，第一步中所述動物為牛、馬、羊、鹿中的一種。

4.根據權利要求3所述的一種抗蝎毒血清的提取方法，其特征在于，第三步中所述抗原濃度為0.1mg/L及1mg/L。

5.根據權利要求4所述的一種抗蝎毒血清的提取方法，其特征在于，第三步中所述佐劑為弗氏完全佐劑。

6.根據權利要求5所述的一種抗蝎毒血清的提取方法，其特征在于，第四步中所述抗凝劑為4％的檸檬酸鈉。

7.根據權利要求6所述的一種抗蝎毒血清的提取方法，其特征在于，第七步中所述膜的孔徑為0.5um。

8.根據權利要求7所述的一種抗蝎毒血清的提取方法，其特征在于，第八步中所述低溫的溫度范圍是3～4℃。