[發(fā)明專利]基于熒光標記氨基酸的染料編碼方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810600979.4
• 申請日: 2018-06-12
• 公開（公告）號: CN108796043B
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 車團結(jié)
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州百源基因技術(shù)有限公司;蘭州百源基因技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12Q1/6837
• 分類號: C12Q1/6837;G01N33/68;G01N33/543
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250
• 代理人: 李靜

本發(fā)明提供了一種基于熒光標記氨基酸的染料編碼方法，包括標簽序列；以氨基酸序列為標簽序列，沿著所述氨基酸序列延伸方向，被分為至少兩個熒光區(qū)域，每個熒光區(qū)域中的氨基酸至少連接一種熒光染料或量子點，相鄰兩個熒光區(qū)域間隔至少3個氨基酸；極大的擴展了標簽序列的編號范圍；通過使用不同顏色的熒光染料或量子點，可以有效的避免光譜之間的重疊。本發(fā)明還提供一種液相芯片，能夠定性和定量的檢測核酸或蛋白，同時能夠?qū)崿F(xiàn)高通量的檢測。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于基因檢測領(lǐng)域，具體涉及基于熒光標記氨基酸的染料編碼方法及其用途。

背景技術(shù)

液體芯片，又稱懸浮陣列，該技術(shù)的核心是將聚苯乙烯微球用熒光染色的方法進行編碼，然后將每種顏色的微球(或稱為熒光編碼微球)共價交聯(lián)上針對特定核酸的探針。應(yīng)用時，將檢測樣本與多種連有特定核酸探針的微球同時進行雜交反應(yīng)，反應(yīng)完成后，儀器通過兩束激光分別識別編碼微球和檢測微球上報告分子的熒光強度，從而對靶核酸進行定量檢測。由于整個反應(yīng)在液相中完成，反應(yīng)速度快，雜交效率高，并可以在一個微量反應(yīng)體系中同時檢測多達上百條靶序列。然而，近年研究結(jié)果顯示，液體芯片技術(shù)尚存在靈敏度較低、重復(fù)性較差等不足，其原因主要是不同熒光標記物的發(fā)射光譜在液相中廣泛重疊，導(dǎo)致大量假陽性結(jié)果產(chǎn)生，限制了液體芯片技術(shù)的進一步推廣應(yīng)用。因此，尋找一種能以不同顏色分別標記探針，且發(fā)光強度高，不易淬滅，光譜之間重疊少的熒光標記物是提高液體芯片檢測靈敏度和重復(fù)性的關(guān)鍵。

發(fā)明內(nèi)容

為此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種以不同顏色分別標記探針且發(fā)光強度高，不易淬滅，光譜之間重疊少的熒光標記氨基酸的染料編碼方法以及液相芯片。

為此，本發(fā)明提供了一種基于熒光標記氨基酸的染料編碼方法，以氨基酸序列為標簽序列，沿著所述氨基酸序列延伸方向，將所述標簽序列分為至少兩個熒光區(qū)域，每個熒光區(qū)域中的氨基酸至少連接一種熒光染料或量子點，相鄰兩個熒光區(qū)域間隔至少3個氨基酸。

優(yōu)選的，所述標簽序列分為至少四個熒光區(qū)域，所述熒光區(qū)域中氨基酸序列的長度為10-15個氨基酸。

優(yōu)選的，任意兩個所述熒光區(qū)域內(nèi)的熒光染料或量子點不相同。

優(yōu)選的，每個所述熒光區(qū)域內(nèi)只有一種氨基酸連接熒光染料或量子點，且同一個熒光區(qū)域內(nèi)的熒光染料或量子點相同。

優(yōu)選的，所述熒光染料包括BODIPY、FITC、羅丹明、香豆素、呫噸、花青素、芘或酞菁；所述量子點選自MgS、MgSe、MgTe、CaS、CaSe、CaTe、ZnO、ZnS、ZnSe、ZnTe、SrS、SrSe、SeTe、CdS、CdSe、CdTe、BaS、BaSe、BaTe、HgS、HgSe、HgTe、PbSe、CaAs、InP、InAs、InCaAs、ZnS/CdS、ZnS/CdS/ZnS、ZnS/HgS/ZnS/CdS、CdS/ZnS、CdS/Ag2S、CdS/HgS、CdS/HgS/CdS、CdS/PbS、CdS/Cd(OH)2、CdSe/CuSe、CdSe/ZnS、CdSe/ZnSe、CdSe/CdS、CdSe/HgSe、CdSe/HgSe/CdSe、CdSe/HgTe、CdTe/HgS、CdTe/HgTe、InAs/ZnSe、InAs/CdSe、InAs/InP、ZnS:Mn、ZnS:Cu、CdS:Mn和CdS:Cu中的任一種，以及以上述任一種為核、二氧化硅為殼的核殼型量子點；

本發(fā)明提供了一種由所述基于熒光標記氨基酸的染料編碼方法編碼得到的標簽序列。

本發(fā)明提供了一種液相芯片，包括：

所述的標簽序列；

與所述標簽序列連接的探針分子P1；

磁性微球；

與磁性微球連接的探針分子P2，所述探針分子P1與所述探針分子P2之間不互相結(jié)合。