[發明專利]一種小球藻保存方法

在審

• 申請號: 201810599963.6
• 申請日: 2018-06-12
• 公開（公告）號: CN108753623A
• 公開（公告）日: 2018-11-06
• 發明（設計）人: 周建波
• 申請（專利權）人: 蘭溪市沉默生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12N1/04;C12R1/89
• 代理公司: 北京國翰知識產權代理事務所(普通合伙) 11696
• 代理人: 呂彩霞

本發明公開了一種小球藻保存方法，包括：1培養，將小球藻接種于培養液中封閉培養至對數生長期待用；2濃縮，離心小球藻藻液得濃縮液，然后置于微波爐中干燥至恒重得干燥藻粉；3保存，將干燥藻粉與蒸餾水置于細胞培養瓶中，然后添加甘油、茶葉提取物、蘆薈提取物，用錫箔紙完全包裹住細胞培養瓶保存。有益效果為：本方法操作簡單，有效保存介質金花茶葉提取物與蘆薈提取物的純度與含量較高，具有較高的生物學活性，使得小球藻能夠保持完整的細胞結構、高成活率，復活后其生物量、葉綠素及活性多糖等重要指標無顯著下降，是一種長時效、活性高、可持續的小球藻保存方法。

技術領域

本發明涉及藻類保存領域，尤其是涉及一種小球藻保存方法。

技術背景

小球藻（Chlorella vulgaris）綠藻綱，小球藻科。單細胞藻，常單生，也有多細胞聚集。細胞球形、橢圓形，內有一個周生、杯狀或片狀的色素體。無性繁殖，每個細胞可以產生2、4、8或16個似親孢子，成熟時母細胞破裂，孢子逸出，長大后即為新個體。世界各地均有分布，多生活于較小淺水，也有海產種類。天然條件下個體較少，人工培養大量繁殖。細胞內的蛋白質、脂肪和碳水化合物含量都很高，又有多種維生素，可食用和作為餌料。

在工業方面，日本很早就開始了對小球藻的研發，成功制作小球藻提取液CGF為食品添加劑，因其具有食品添加劑所特有的優點，被快速運用到許多食品中。而在發酵工業也利用小球藻的發酵作用使有利微生物快速繁殖。并且，在水產養殖方面，小球藻還可作為魚、蝦、蟹以及貝類等的飼料，具有良好的投喂效果。隨著低溫生物學的快速發展，低溫保存技術在醫學、食品工業及農業上尤其是微生物保存、精子冷凍等多方面均有了廣泛的應用。海洋微藻營養豐富，含有大量的蛋白質、多糖、不飽和脂肪酸、多種維生素等營養物質，被廣泛的應用于水產養殖，但微藻自身的生長易受環境、氣候等因素的影響，往往會給水產養殖業帶來很大的不便，故而研究開發低溫生物學在微藻中的應用也越來越受到重視。目前，缺乏一種保存效果好的小球藻保存方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種小球藻保存方法，本方法操作簡單，有效保存介質金花茶葉提取物與蘆薈提取物的純度與含量較高，具有較高的生物學活性，使得小球藻能夠保持完整的細胞結構、高成活率，復活后其生物量、葉綠素及活性多糖等重要指標無顯著下降，是一種長時效、活性高、可持續的小球藻保存方法。

本發明針對背景技術中提到的問題，采取的技術方案為：

一種小球藻保存方法，包括：培養、濃縮、保存，具體包括以下步驟：

培養：將小球藻接種于培養液中封閉培養，培養光照周期為10～12L:12～14D、溫度為20～22℃，接種后及加水擴種后施用無機肥碳酸氫銨與過磷酸鈣的質量比為3～4:1，按照每平方米水面潑灑25～35g全池均勻潑灑，每天施肥1次，每天監測試驗池的藻細胞密度和水化學指標，將微藻培養至對數生長期，待用；在適宜培養條件下培養微藻菌種，能夠促進微藻菌種健康的生長與繁殖，培養至對數生長期后進行濃縮保存有利于保持小球藻較為旺盛的生命力，易于提高其活性與成活率；

濃縮：取對數期小球藻藻液，在500～800r/min轉速離心15～35min，去除上清液得小球藻濃縮液，然后置于微波爐中，將微波爐功率調節至最大功率的20～30%，干燥至恒重，得到微波干燥藻粉；使用微波爐干燥小球藻藻液，可以較高效率的實現脫水干燥，使小球藻保持在對數生長期的旺盛生命狀態，同時還可以降低處理時間，節約能源；