[發明專利]一種單端孢霉烯類化合物及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201810597998.6
• 申請日: 2018-06-12
• 公開（公告）號: CN108794502B
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發明（設計）人: 丁立建;何山;劉勇;賀小平;金海曉;斯拉瓦·愛潑斯坦
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C07D493/22
• 分類號: C07D493/22;C12P17/18;A61P31/04;C12R1/77
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理有限公司 33226
• 代理人: 何仲

本發明公開了一種單端孢霉烯類化合物及其制備方法和用途，特點是該單端孢霉烯類化合物的結構式如Ⅰ所示，其制備方法步驟包括將保藏號為CGMCC No.14121的鐮刀菌通過微生物發酵培養來獲取單端孢霉烯類化合物的發酵物，通過紗布過濾使菌絲體與發酵液分離；然后將菌絲體加入到甲醇中超聲破碎，再用乙酸乙酯等體積萃取3次，將萃取物用旋轉蒸發儀蒸干得到菌體浸膏；將發酵液用等體積的乙酸乙酯萃取3次，合并收集乙酸乙酯相，將乙酸乙酯相用旋轉蒸發儀蒸干得到菌液浸膏，合并菌體浸膏和菌液浸膏得到總粗浸膏；最后將總粗浸膏用乙腈溶解后，用半制備反相高效液相色譜進行分離純化得到，優點是對水產致病菌哈維弧菌具有抑制作用。

技術領域

本發明涉及一種單端孢霉烯類化合物，尤其是涉及一種單端孢霉烯類化合物及其制備方法和用途。

背景技術

已報道的單端孢霉烯類化合物具有多方面的生物活性，包括抗腫瘤、抗HIV、抗菌、抗瘧、抗白血病、抑制蛋白質的合成、抑制DNA和RNA的合成、免疫抑制、以及用做生物除草劑和殺蟲劑等生物活性。本發明人研究得知，海洋真菌液體發酵產物經乙酸乙酯提取，提取物有較好的抗菌活性，于是對其活性成分進行了研究。目前尚未見該化合物結構及抗哈維弧菌活性的報道，因此市場上也尚未見有與此相關的藥物。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種對水產致病菌哈維弧菌具有一定的抑制作用的單端孢霉烯類化合物及其制備方法和用途。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種單端孢霉烯類化合物，該化合物的結構式如下Ι所示：

(Ι)。

上述單端孢霉烯類化合物的制備方法，包括以下步驟：

(1)發酵生產

將保藏編號為CGMCC No. 14121的鐮刀菌(Fusarium sp.)菌種劃線復活，接種到PDB固體培養基，28℃培養箱中活化3天，用接種針從斜面中挑取一個菌落接種到PDB液體培養基中，于28℃，在轉速為180rpm的搖床上震蕩培養3天得到種子液，然后將種子液以體積比10%的接種量接到PDB液體培養基中，于28℃，在轉速為180rpm的搖床上震蕩培養12天，獲得菌株發酵物，將菌株發酵物通過紗布過濾分離獲得菌絲體與發酵液；

(2)浸膏獲取

將步驟（1）得到的菌絲體加入到甲醇中超聲破碎，再用乙酸乙酯等體積萃取3次，將萃取物用旋轉蒸發儀蒸干得到菌體浸膏；將步驟（1）得到的發酵液用等體積的乙酸乙酯萃取3次，合并收集乙酸乙酯相，將乙酸乙酯相用旋轉蒸發儀蒸干得到菌液浸膏；將菌體浸膏和菌液浸膏合并得到總粗浸膏；

(3)化合物Ι的分離精制

將步驟（2）得到的總粗浸膏用乙腈溶解后，用半制備反相高效液相色譜進行分離純化得到單端孢霉烯類化合物，其結構如下所示：

(Ι)。

所述的PDB固體培養基的配制方法如下：將26g馬鈴薯、35g海鹽和20g瓊脂溶于1L蒸餾水中；所述的PDB液體培養基的配制方法如下：將26g馬鈴薯和35g海鹽溶于1L蒸餾水中，調pH至7.6-7.8。

所述的半制備反相高效液相色譜的洗脫液為乙腈與水按體積65:35的比例混合而成。

上述單端孢霉烯類化合物的用途，所述的單端孢霉烯類化合物在用于制備水產致病菌哈維弧菌抑制劑方面的用途。

與現有技術相比，本發明的優點在于：本發明一種單端孢霉烯類化合物及其制備方法和用途，通過海洋真菌發酵培養來獲取單端孢霉烯類化合物的發酵物，然后將發酵產物用乙酸乙酯提取，得粗浸膏，將該提取物經反相半制備高效液相色譜分離純化得到，該單端孢霉烯類化合物具有抗水產致病菌哈維弧菌的作用。