[發明專利]一種含有硼酯單元聚合物的抗體偶聯物及其構建方法

有效

• 申請號: 201810584717.3
• 申請日: 2018-06-08
• 公開（公告）號: CN108721642B
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 汪長春;萬家勛;李永婧
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: A61K47/68
• 分類號: A61K47/68;A61K47/69
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 陸飛;陸尤

1. 一種聚天冬氨酸載藥膠束-Tf偶聯物的制備方法，其特征在于，具體步驟如下：

步驟1：聚天冬氨酸的制備和炔基化修飾

將L-天冬氨酸粉末、85%磷酸（H₃PO₄）、環丁砜和均三甲苯混勻，經微波反應后，以水和乙醇多次洗滌，真空干燥后得到的聚琥珀酰亞胺與2-[2-(2-丙炔基氧)乙氧基]乙胺溶解于二甲基甲酰胺（DMF），室溫下反應12小時后經數次DMF溶解-乙醚沉淀離心過程后，真空干燥得炔基修飾的聚天冬氨酸；

步驟2：聚天冬氨酸接枝聚乙二醇、2-(羥甲基)苯硼酸環狀單酯和藥物分子

將炔基修飾的聚天冬氨酸用DMF溶解，加入DMF溶解的疊氮化聚乙二醇單甲醚（mPEG-N₃）和疊氮化2-(羥甲基)苯硼酸單酯（BB-N₃），在氮氣氛圍下加入碘化亞銅（CuI）和 N,N,N',N'',N''-五甲基二亞乙基三胺（PMDETA），除去殘留氧氣后在60℃下攪拌8 h后，加入單端疊氮單端磺酸根的吲哚菁綠（ICG-N₃）、CuI和PMDETA，除去殘留氧氣后在35℃下繼續反應16h，經多次乙醚沉淀-DMF溶解過程后得到聚天冬氨酸載藥膠束PAsp-g-(PEG-BB-ICG)，所述PAsp-g-(PEG-BB-ICG)結構式為：

；

步驟3：聚天冬氨酸載藥膠束與Tf偶聯

將PAsp-g-(PEG-BB-ICG)溶解于去離子水中配置為5 mg/ml水溶液，Tf溶于0.1 M磷酸鹽緩沖液中，濃度為10 mg/ml，PAsp-g-(PEG-BB-ICG)水溶液和Tf的磷酸鹽緩沖溶液以不同比例混合，渦旋混勻，靜置10 min使其完全反應得Tf-PAsp-g-(PEG-BB-ICG)偶聯物，所述Tf是糖基化轉鐵蛋白，所述偶聯是通過聚合物載體上帶有未反應2-(羥甲基)苯硼酸環狀單酯單元與抗體Y形下端可結晶段上糖鏈的鄰二醇基團反應，在室溫、中性pH條件下形成五元硼酯環。

2.一種由權利要求1所述制備方法制備得到的抗體偶聯物。

3.如權利要求2所述的抗體偶聯物在制備癌癥靶向治療物中的用途。