[發(fā)明專利]一種病毒原液的制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810584021.0 | 申請日： | 2018-06-08 |
| 公開（公告）號： | CN108841794B | 公開（公告）日： | 2021-11-30 |
| 發(fā)明（設計）人： | 汪濤 | 申請（專利權）人： | 蘇州良辰生物醫(yī)藥科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N7/00 | 分類號： | C12N7/00;C12R1/93 |
| 代理公司： | 蘇州創(chuàng)元專利商標事務所有限公司 32103 | 代理人： | 汪青;周敏 |
| 地址： | 215613 江蘇省蘇州市張家*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 病毒 原液 制備 方法 | ||
1.一種病毒原液的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：
（1）、宿主細胞由種子細胞擴大培養(yǎng)得到，且待培養(yǎng)皿表面80%以上的面積長有所述的宿主細胞后，將宿主細胞用無血清培養(yǎng)基進行清洗；
（2）、將葡聚糖、磷酸鹽緩沖液和病毒配制成混合液，其中，所述的混合液中葡聚糖的濃度為15~30μg/mL，所述的病毒的體積百分濃度為0.005%～0.1%；
（3）、將步驟（2）制得的所述的混合液加入到經(jīng)步驟（1）處理后的宿主細胞中進行吸附感染，吸附感染完成后，棄去上清液，收集宿主細胞用于步驟（4）；
（4）、將經(jīng)步驟（3）處理后的宿主細胞用含有胎牛血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)；
（5）、將經(jīng)步驟（4）處理后的宿主細胞進行凍融使病毒釋放，然后經(jīng)離心得到所述的病毒原液；
所述的宿主細胞為CHO細胞；所述的病毒為異嗜性小鼠白血病病毒。
2. 根據(jù)權利要求1所述的病毒原液的制備方法，其特征在于：步驟（3）中，所述的混合液的投料體積與所述的培養(yǎng)皿的表面面積的比為0.015~0.055 mL /cm2。
3.根據(jù)權利要求1所述的病毒原液的制備方法，其特征在于：步驟（3）中進行所述的吸附感染時，通過震蕩使所述的病毒與所述的宿主細胞接觸。
4.根據(jù)權利要求1所述的病毒原液的制備方法，其特征在于：步驟（3）中，控制所述的吸附感染的時間為2~4小時。
5.根據(jù)權利要求1所述的病毒原液的制備方法，其特征在于：步驟（4）中，控制所述的培養(yǎng)的時間為7~10天。
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