[發(fā)明專利]螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的構(gòu)建和使用方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810577087.7
• 申請日: 2018-06-06
• 公開（公告）號: CN108553453A
• 公開（公告）日: 2018-09-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 胡庭俊;谷俐媛;陳忠偉;梁萬文;何穎;韋英益;施君;邱潔
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西大學(xué);廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究院;廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所
• 主分類號: A61K31/015
• 分類號: A61K31/015;A61K35/748;A61P29/00;A61K49/00
• 代理公司: 廣西南寧公平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 45104
• 代理人: 楊立華

本發(fā)明公開了一種螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的構(gòu)建方法，即以二甲苯為致炎劑建立小鼠耳急性腫脹的驗證模型。通過檢測模型小鼠血清中IL?2、IL?6、IL?1β、TNF?α、IFN?γ含量，記錄小鼠臟器指數(shù)，制作胸腺、脾臟病理組織切片，從組織形態(tài)學(xué)方面觀察胸腺與脾臟的組織結(jié)構(gòu)變化，評價螺旋藻提取物的抗炎效果。研究表明，螺旋藻提取物在一定程度上能提升小鼠的IL?2、IL?6水平，降低小鼠的IL?1β水平，對小鼠的TNF?α、IFN?γ恢復(fù)到正常水平具有一定的積極作用，從而抑制相關(guān)的病理損傷過程，減輕炎癥損傷。因此，應(yīng)用本發(fā)明可為螺旋藻的深層次開發(fā)利用及臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于螺旋藻開發(fā)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的構(gòu)建和使用方法。

背景技術(shù)

炎癥是動物機體對不良刺激的一種防御性反應(yīng)，有時，炎癥反應(yīng)對機體來說是有益的，但更多的時候是有害的。炎癥反應(yīng)是很多疾病發(fā)生發(fā)展的基礎(chǔ)，隨著炎癥反應(yīng)的進行，很多疾病開始出現(xiàn)，對機體造成損傷。因此，抗炎作用是很多藥物開發(fā)及研究的重點方向之一。糖皮質(zhì)激素是由腎上腺分泌的一種具有強大而迅速的抗炎作用的的激素類藥物，但糖皮質(zhì)激素存在精神異常、抑制免疫、過敏性皮疹等不良反應(yīng)。近年來，隨著中藥制劑的進一步研究發(fā)展，中藥制劑在抗炎方面的作用也得以發(fā)現(xiàn)及應(yīng)用。藻藍蛋白的抗氧化活性研究一直是其藥理活性研究的熱點，許多研究表明無論在體內(nèi)還是內(nèi)外，螺旋藻提取物中含有的藻藍蛋白都可以抑制脂質(zhì)體過氧化反應(yīng)，具有抗氧化生物活性，減輕炎癥的功能。螺旋藻提取物因其豐富的營養(yǎng)和良好的醫(yī)療保健效果受到廣泛關(guān)注，具有抗炎、抗氧化、增強免疫等功效，具有良好的研究開發(fā)前景。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的構(gòu)建和使用方法，為螺旋藻提取物抗炎作用的臨床開發(fā)和應(yīng)用提供有力的參考依據(jù)。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的構(gòu)建方法，以二甲苯為致炎劑建立小鼠耳急性腫脹的驗證模型。

上述構(gòu)建方法，在小鼠左耳根部兩面用1mL注射器均勻涂抹上0.05mL的二甲苯，待小鼠出現(xiàn)耳腫脹即得。

上述構(gòu)建方法所得螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的使用方法，包括以下步驟：

<1>動物飼養(yǎng)及處理方法

將平均體重為18-22g的70只清潔級昆明種小鼠常規(guī)飼養(yǎng)3天后，隨機分為7組，雌雄各半，設(shè)置空白對照組、陽性對照組、0.05％螺旋藻提取物添加組、0.1％螺旋藻提取物添加組、0.2％螺旋藻提取物添加組、0.3％螺旋藻提取物添加組、0.4％螺旋藻提取物添加組，連用5天；小鼠用藥及致炎前各稱體重一次；

<2>致炎模型的建立；

<3>觀測螺旋藻提取物對小鼠臟器指數(shù)的影響；

<4>檢測IL-2、IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ含量。

步驟<2>按以下操作進行：最后一次給藥后一小時后，小鼠左耳根部兩面用1mL注射器均勻涂抹上0.05mL的二甲苯，靜候20min，而后用6mm的打孔器在小鼠左右耳同一位置打下耳片，迅速稱重，計算小鼠的耳腫脹度、耳腫脹率及腫脹抑制率。

耳腫脹度、耳腫脹率及腫脹抑制率分別按以下公式計算：

小鼠耳腫脹度＝左耳質(zhì)量-右耳質(zhì)量；

耳腫脹率＝(左耳質(zhì)量-右耳質(zhì)量)/右耳質(zhì)量；

腫脹抑制率＝(空白組平均腫脹度-用藥組平均腫脹度)/空白組平均腫脹度×100％。