[發明專利]螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的構建和使用方法

在審

• 申請號: 201810577087.7
• 申請日: 2018-06-06
• 公開（公告）號: CN108553453A
• 公開（公告）日: 2018-09-21
• 發明（設計）人: 胡庭俊;谷俐媛;陳忠偉;梁萬文;何穎;韋英益;施君;邱潔
• 申請（專利權）人: 廣西大學;廣西壯族自治區水產科學研究院;廣西壯族自治區獸醫研究所
• 主分類號: A61K31/015
• 分類號: A61K31/015;A61K35/748;A61P29/00;A61K49/00
• 代理公司: 廣西南寧公平知識產權代理有限公司 45104
• 代理人: 楊立華

1.一種螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的構建方法，其特征在于以二甲苯為致炎劑建立小鼠耳急性腫脹的驗證模型。

2.根據權利要求1所述的螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的構建方法，其特征在于在小鼠左耳根部兩面用1mL注射器均勻涂抹上0.05mL的二甲苯，待小鼠出現耳腫脹即得。

3.權利要求1所述構建方法所得螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的使用方法，其特征在于包括以下步驟：

<1>動物飼養及處理方法

將平均體重為18-22g的70只清潔級昆明種小鼠常規飼養3天后，隨機分為7組，雌雄各半，設置空白對照組、陽性對照組、0.05％螺旋藻提取物添加組、0.1％螺旋藻提取物添加組、0.2％螺旋藻提取物添加組、0.3％螺旋藻提取物添加組、0.4％螺旋藻提取物添加組，連用5天；小鼠用藥及致炎前各稱體重一次；

<2>致炎模型的建立；

<3>觀測螺旋藻提取物對小鼠臟器指數的影響；

<4>檢測IL-2、IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ含量。

4.根據權利要求1所述的螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的使用方法，其特征在于步驟<2>按以下操作進行：最后一次給藥后一小時后，小鼠左耳根部兩面用1mL注射器均勻涂抹上0.05mL的二甲苯，靜候20min，而后用6mm的打孔器在小鼠左右耳同一位置打下耳片，迅速稱重，計算小鼠的耳腫脹度、耳腫脹率及腫脹抑制率。

5.根據權利要求1所述的螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的使用方法，其特征在于所述耳腫脹度、耳腫脹率及腫脹抑制率分別按以下公式計算：

小鼠耳腫脹度＝左耳質量-右耳質量；

耳腫脹率＝(左耳質量-右耳質量)/右耳質量；

腫脹抑制率＝(空白組平均腫脹度-用藥組平均腫脹度)/空白組平均腫脹度×100％。

6.根據權利要求1所述的螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的使用方法，其特征在于步驟<3>按以下操作進行：致炎及取下小鼠耳片后，解剖小鼠，肉眼觀察其各組織器官，摘取小鼠肝臟、腎臟及胸腺進行稱重，記錄并計算其各臟器指數。

7.根據權利要求1所述的螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的使用方法，其特征在于所述臟器指數按以下公式計算：臟器指數＝各臟器質量/小鼠體重。

8.根據權利要求1所述的螺旋藻提取物抗炎作用研究動物模型的使用方法，其特征在于步驟<4>按以下操作進行：檢測小鼠血清中IL-2、IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ含量，制作胸腺、脾臟病理組織切片，從組織形態學方面觀察胸腺與脾臟的組織結構變化，評價螺旋藻提取物的抗炎效果。