[發明專利]一種檢測模塊及方法

有效

• 申請號: 201810576135.0
• 申請日: 2018-06-06
• 公開（公告）號: CN108823288B
• 公開（公告）日: 2020-07-28
• 發明（設計）人: 許文濤;羅云波;苗苗;杜再慧;田晶晶;梁志宏;黃昆侖
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12Q1/682
• 分類號: C12Q1/682
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測模塊，所述模塊包括發卡型核酸序列1、發卡型核酸序列2和促發子核酸序列，其特征在于：

所述發卡型核酸序列1從5’端到3’端依次包括序列a、b、c、d、b’；

所述發卡型核酸序列2從5’端到3’端依次包括序列b’、a’、e、b、d’；

所述促發子核酸序列從5’端到3’端依次包括序列b’、a’；

所述b與b’的核酸序列反向互補雜交，所述a與a’的核酸序列反向互補雜交，所述d與d’的核酸序列反向互補雜交，所述c、e包括核苷酸個數為1個以上的任意核酸序列。

2.根據權利要求1所述的檢測模塊，其特征在于，所述模塊包括下述1)-3)所述中的至少一種：

1)所述c、e包括核苷酸個數為15個的任意核酸序列；

2)所述b、b’的核苷酸個數為18個；

3)所述a、a’、d、d’的核苷酸個數為6個。

3.根據權利要求1或2所述的檢測模塊，其特征在于，所述模塊包括下述1)-3)所述中的至少一種：

1)所述促發子核酸序列為序列表中SEQ ID№：4所示核苷酸序列；或將序列表中SEQ ID№：4所示核苷酸序列經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與所述促發子具有相同功能的核苷酸序列；

2)所述發卡型核酸序列1為序列表中SEQ ID№：7所示核苷酸序列；或將序列表中SEQID№：7所示核苷酸序列經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與所述發卡型核酸序列1具有相同功能的核苷酸序列；

3)所述發卡型核酸序列2為序列表中SEQ ID№：8所示核苷酸序列；或將序列表中SEQID№：8所示核苷酸序列經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與所述發卡型核酸序列2具有相同功能的核苷酸序列。

4.根據權利要求1、2或3任一所述的檢測模塊，其特征在于，所述模塊還包括核酸序列3和核酸序列4；

所述核酸序列3從5’端到3’端依次包括序列f、g、x’；

所述核酸序列4從5’端到3’端依次包括序列h、i、j；

所述g、i中包含內切酶識別和/或酶切核酸序列的反向互補雜交序列；

所述x’包含與待測靶標核酸序列互補雜交的核酸序列；

所述f、h或j均各自包含a’、e。

5.根據權利要求4所述的檢測模塊，其特征在于，所述模塊還包括下述1)-3)所述中的至少一種：

1)所述f、h或j均各自從5’端到3’端依次包括b’的部分核酸序列、a’、e、b的部分核酸序列；

2)所述f、h、j任意一條序列的反向互補雜交序列，與所述發卡型核酸序列2的互補雜交的△G，是所述發卡型核酸序1與所述發卡型核酸序2互補雜交的△G的兩倍以上；

3)所述f、h、j任意一條序列的反向互補雜交序列，與所述發卡型核酸序列2互補雜交所需要的最低反應溫度，要低于所述發卡型核酸序1或所述發卡型核酸序2自身的解鏈溫度Tm。

6.根據權利要求4或5任一所述的檢測模塊，其特征在于，所述模塊包括下述1)-2)所述中的至少一種：

1)序列表中SEQ ID№：2所示核苷酸序列；或將序列表中SEQ ID№：2所示核苷酸序列經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與所述核酸序列3具有相同功能的核苷酸序列；

2)序列表中SEQ ID№：3所示核苷酸序列；或將序列表中SEQ ID№：3所示核苷酸序列經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與所述核酸序列4具有相同功能的核苷酸序列。

7.一種檢測傳感器，其特征在于，所述傳感器包括權利要求1-6任一所述的檢測模塊；所述傳感器還包括下述1)-5)所述中的至少一種：

1)HCR反應緩沖液；

2)DNA聚合酶；

3)內切酶；

4)EXPAR反應緩沖液；

5)dNTP。

8.權利要求1-6任一所述檢測模塊、或權利要求7所述傳感器在制備檢測生物樣品和或非生物樣品的試劑中的應用。