[發明專利]一種同時檢測禽白血病病毒抗體和雞白痢沙門氏菌抗體的試劑盒有效
| 申請號: | 201810575755.2 | 申請日: | 2018-06-06 |
| 公開(公告)號: | CN108709995B | 公開(公告)日: | 2020-05-22 |
| 發明(設計)人: | 鄭世軍;王永強;游廣炬;李曉齊;曹紅 | 申請(專利權)人: | 中國農業大學 |
| 主分類號: | G01N33/569 | 分類號: | G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司: | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人: | 潘穎;趙青朵 |
| 地址: | 100083 北京市海淀*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 同時 檢測 白血病病毒 抗體 白痢 沙門氏菌 試劑盒 | ||
1.一種同時檢測禽白血病病毒抗體和雞白痢沙門氏菌抗體的試劑盒,其特征在于,包括:p27蛋白、GroEL-Δ8-1蛋白、酶標記的第二抗體、BSA、包被液、封閉液、顯色液和終止液;封閉液為脫脂乳;
所述p27蛋白和GroEL-Δ8-1蛋白在包被時的總濃度為4μg/mL;
所述GroEL-Δ8-1蛋白與所述p27蛋白在包被時的質量比為1:2;
所述p27蛋白的制備方法為:采用SEQ ID NO:1所示上游引物和SEQ ID NO:2所示下游引物擴增得到p27基因片段,將p27基因插入原核表達載體,轉入表達宿主,經誘導表達、收集菌體、裂解、純化,得到p27蛋白;
所述GroEL-Δ8-1蛋白的制備方法為:采用SEQ ID NO:3所示上游引物和SEQ ID NO:4所示下游引物擴增得到GroEL-Δ8-1基因片段,將GroEL-Δ8-1基因插入原核表達載體,轉入表達宿主,經誘導表達、收集菌體、裂解、純化,得到GroEL-Δ8-1蛋白。
2.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述酶標記的第二抗體為辣根過氧化物酶標記的兔抗雞IgG。
3.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述包被液為pH為9.6的包被液。
4.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述BSA為質量百分濃度為0.5%的BSA。
5.根據權利要求1所述的試劑盒,其特征在于,所述顯色液為TMB顯色液。
6.根據權利要求1至5中任一項所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括酶標板和/或PBST緩沖液。
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