[發明專利]一種檢驗檸檬黃染色蒲黃的檢測方法

在審

• 申請號: 201810572091.4
• 申請日: 2018-06-06
• 公開（公告）號: CN108760926A
• 公開（公告）日: 2018-11-06
• 發明（設計）人: 耿代云;楊志偉;鄭喜紅;孫振學;范純玲;石鑫磊
• 申請（專利權）人: 松原市食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 長春市吉利專利事務所 22206
• 代理人: 李曉莉

1.一種檢驗檸檬黃染色蒲黃的檢測方法，其特征是：包括以下步驟，且以下步驟順次進行，

步驟一、取待測粉末2g，稱定后加入濃度為70％的乙醇溶液20ml，超聲處理20分鐘，靜止自然冷卻，加入濃度為70％的乙醇溶液補足超聲處理減失的重量，離心后取上清液作為供試品溶液；

步驟二、取對照試劑檸檬黃2g，加入濃度為70％的乙醇溶液，制備為每1ml溶液含0.5mg對照試劑的溶液，作為照品溶液；

步驟三、取供試品溶液10μl～20μl，照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，采用體積分數比為1：3：3：1：1的乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水溶液為展開劑展開，取出晾干，觀察樣品色譜中，在與對照試劑色譜相對應的位置上的斑點顏色；

步驟四、斑點顏色相同，采用高效液相色譜法驗證

A、對照試劑溶液的制備

稱取對照試劑檸檬黃2g，加入濃度為70％的乙醇溶液，制備為每1ml溶液含25μg對照試劑的溶液，搖勻，作為對照試劑溶液；

B、樣品溶液的制備

稱取蒲黃藥材粉末2g，加入濃度為70％的乙醇溶液20ml，超聲處理20分鐘，靜止自然冷卻，加入濃度為70％的乙醇溶液補足超聲處理減失的重量，離心后取上清液作為樣品溶液；

C、測定結果分析

分別取樣品溶液和對照試劑溶液各10μl，注入液相色譜儀測定，測定結果中出現色譜峰與對照試劑保留時間不同，測定結束；測定結果中出現色譜峰與對照試劑保留時間相同，采用二極管陣列檢測器對比相應色譜峰在200nm～600nm波長范圍的紫外可見吸收光譜,光譜不同，測定結束；

步驟五、采用高效液相色譜與質譜聯用進行進一步測定

選擇250mm色譜柱，采用乙腈-0.02mol/L醋酸流動相系統，質譜檢測結果通過吸收光譜在400nm～450nm為最大吸收峰判定。

2.根據權利要求1所述的一種檢驗檸檬黃染色蒲黃的檢測方法，其特征是：所述步驟四中高效液相色譜法的色譜條件為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇和0.02mol/L的乙酸銨溶液為流動相，儀器為二極管陣列檢測器，檢測波長為428nm。

3.根據權利要求1所述的一種檢驗檸檬黃染色蒲黃的檢測方法，其特征是：所述步驟五中質譜檢測的掃描方式為二級質譜負離子模式，霧化氣為氮氣，霧化氣壓力為35.00psi，毛細管電壓為-126.2volt，干燥氣溫度為350℃，干燥氣流速為12.00l/min，母離子掃描范圍為466.7m/z，子離子掃描范圍170m/z～400m/z。