[發(fā)明專利]一種檢驗(yàn)檸檬黃染色蒲黃的檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810572091.4
• 申請(qǐng)日: 2018-06-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108760926A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-11-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 耿代云;楊志偉;鄭喜紅;孫振學(xué);范純玲;石鑫磊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 松原市食品藥品檢驗(yàn)所
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 長(zhǎng)春市吉利專利事務(wù)所 22206
• 代理人: 李曉莉

1.一種檢驗(yàn)檸檬黃染色蒲黃的檢測(cè)方法，其特征是：包括以下步驟，且以下步驟順次進(jìn)行，

步驟一、取待測(cè)粉末2g，稱定后加入濃度為70％的乙醇溶液20ml，超聲處理20分鐘，靜止自然冷卻，加入濃度為70％的乙醇溶液補(bǔ)足超聲處理減失的重量，離心后取上清液作為供試品溶液；

步驟二、取對(duì)照試劑檸檬黃2g，加入濃度為70％的乙醇溶液，制備為每1ml溶液含0.5mg對(duì)照試劑的溶液，作為照品溶液；

步驟三、取供試品溶液10μl～20μl，照品溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，采用體積分?jǐn)?shù)比為1：3：3：1：1的乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水溶液為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出晾干，觀察樣品色譜中，在與對(duì)照試劑色譜相對(duì)應(yīng)的位置上的斑點(diǎn)顏色；

步驟四、斑點(diǎn)顏色相同，采用高效液相色譜法驗(yàn)證

A、對(duì)照試劑溶液的制備

稱取對(duì)照試劑檸檬黃2g，加入濃度為70％的乙醇溶液，制備為每1ml溶液含25μg對(duì)照試劑的溶液，搖勻，作為對(duì)照試劑溶液；

B、樣品溶液的制備

稱取蒲黃藥材粉末2g，加入濃度為70％的乙醇溶液20ml，超聲處理20分鐘，靜止自然冷卻，加入濃度為70％的乙醇溶液補(bǔ)足超聲處理減失的重量，離心后取上清液作為樣品溶液；

C、測(cè)定結(jié)果分析

分別取樣品溶液和對(duì)照試劑溶液各10μl，注入液相色譜儀測(cè)定，測(cè)定結(jié)果中出現(xiàn)色譜峰與對(duì)照試劑保留時(shí)間不同，測(cè)定結(jié)束；測(cè)定結(jié)果中出現(xiàn)色譜峰與對(duì)照試劑保留時(shí)間相同，采用二極管陣列檢測(cè)器對(duì)比相應(yīng)色譜峰在200nm～600nm波長(zhǎng)范圍的紫外可見(jiàn)吸收光譜,光譜不同，測(cè)定結(jié)束；

步驟五、采用高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用進(jìn)行進(jìn)一步測(cè)定

選擇250mm色譜柱，采用乙腈-0.02mol/L醋酸流動(dòng)相系統(tǒng)，質(zhì)譜檢測(cè)結(jié)果通過(guò)吸收光譜在400nm～450nm為最大吸收峰判定。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢驗(yàn)檸檬黃染色蒲黃的檢測(cè)方法，其特征是：所述步驟四中高效液相色譜法的色譜條件為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇和0.02mol/L的乙酸銨溶液為流動(dòng)相，儀器為二極管陣列檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為428nm。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢驗(yàn)檸檬黃染色蒲黃的檢測(cè)方法，其特征是：所述步驟五中質(zhì)譜檢測(cè)的掃描方式為二級(jí)質(zhì)譜負(fù)離子模式，霧化氣為氮?dú)?，霧化氣壓力為35.00psi，毛細(xì)管電壓為-126.2volt，干燥氣溫度為350℃，干燥氣流速為12.00l/min，母離子掃描范圍為466.7m/z，子離子掃描范圍170m/z～400m/z。