[發明專利]靶向EGFR的嵌合抗原受體及其用途

在審

• 申請號: 201810568227.4
• 申請日: 2018-06-05
• 公開（公告）號: CN110564749A
• 公開（公告）日: 2019-12-13
• 發明（設計）人: 金濤;王海鷹
• 申請（專利權）人: 上海恒潤達生生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C07K19/00;C12N15/867;A61K35/17;A61P35/00
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本發明涉及靶向EGFR的嵌合抗原受體及其用途。具體而言，本發明提供一種多核苷酸序列，選自：(1)含有依次連接的抗EGFR單鏈抗體的編碼序列、人CD8α鉸鏈區的編碼序列、人CD8跨膜區的編碼序列、人41BB胞內區的編碼序列、人CD3ζ胞內區的編碼序列的多核苷酸序列；和(2)(1)所述多核苷酸序列的互補序列。本發明還提供相關的融合蛋白、含所述編碼序列的載體，以及所述融合蛋白、編碼序列、載體的用途。

技術領域

本發明屬于細胞治療領域，具體涉及靶向EGFR的嵌合抗原受體及其用途。

背景技術

腦膠質母細胞瘤GBM(Glioblastoma multiforme)是最常見的腦腫瘤，手術治療、放療及結合替莫唑胺的輔助化療是臨床主要的治療方法，但膠質母細胞瘤臨床治療效果不理想，中位生存期僅在12個月內，易復發預后差。表皮生長因子受體EGFR(epidermalgrowth factor receptor)基因擴增、突變和重排與腫瘤生長、血管生成及腫瘤的進展和治療耐性密切相關。

表皮生長因子(epidermal growth factor，EGF)，自其于1962年發現之日起至今，生長因子與EGFR之間的關系的研究已取得了極大的起色。此中ErbB家族我們對其最為了解，這個受體家族包括表皮生長因子受體(EGFR，又叫做ErbB1/HER1)、ErbB2(又被稱為p185Neu/HER2)，ErbB3和ErbB4(又被稱為HER4)，四個家族組成部分均由胞外配體結合部分)、跨膜部分(在胞外和胞內起信息傳導作用)和細胞內部分(包括胞體內活化部分與下游配體)。下游底物的活化和基因轉錄與細胞分裂、增殖及細胞死亡、遷移和侵襲等密切相關。這些受體被證實在人類腫瘤中過表達、擴增或重排。在所有的突變體中，最常見的突變體是表皮生長因子受體Ⅲ型突變體，EGFRvlII研究證明其有促成腫瘤的發展和形成。EGFRvlII首先在膠質母細胞瘤研究中被發現，由于mRNA剪切或基因重排致第2至第7外顯子缺失，EGFRvlII缺失與配體相結合的胞外區267個氨基酸，融合位點處生成一個新的甘氨酸。缺失了胞外配體結合區的EGFRvlII可以在沒有配體結合的情況下，致受體不依賴于配體的組成性激活酪氨酸激酶，激活下游的多條信號傳導通路，包括磷酸磷脂酰肌醇3羥基激酶(PI3K)/Akt1、Ras和絲裂原活化蛋白激酶等多條信號傳導通路，引起級聯反應,促進瘤細胞增殖、血管生成、抑制凋亡等。EGFRvlII可使腫瘤細胞表型發生轉化，表現為致瘤性、侵襲力增強。EGFRvlII信號傳導能力的增強使EGFRvlII活性和致瘤性增加，這可能與受損的內吞作用、延長信號的時間、無效地泛素化和增強受體的二聚化等因素有關。

膠質母細胞瘤(GBM)是常見的易復發的腦腫瘤，其中血管較為豐富且呈現浸潤性生長的特點是主要原因。膠質母細胞瘤患者中約30％存在EGFRvIII的突變，與其生存率低密切相關，雖然經過手術、放療和化療綜合治療，中位生存期仍比較短。隨著科學的不斷進步，尤其是分子生物學的進步，膠質瘤的治療方式也逐步由單一手術治療變為綜合化學治療、放射治療、分子靶向治療等多方式同時治療。近期高特異性，低副作用的分子靶向藥物個體化治療成為人們關注的熱點。因此尋找與母細胞瘤相關的靶點對于多形性膠質母細胞瘤的臨床治療有著極其重要的臨床意義。EGFRvIII的在膠質母細胞瘤的表達率高，約30％-40％的膠質母細胞瘤患者檢測到的EGFRvIII的表達，正常腦組織不表達使其成為一個非常理想的多形性膠質母細胞瘤治療靶標。目前以EGFRvIII為靶點的治療措施有：單克隆抗體(例如西妥昔單抗和mAb528)；小分子酪氨酸激酶抑制劑；免疫治療如疫苗等，很多實驗室做了臨床前期的相關研究。體外數據顯示，西妥昔單抗是針對EGFRvIII特異性抗體，其特異性結合EGFRvIII，