[發明專利]一種檢測四環素類藥物的時間分辨熒光免疫層析試紙條及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201810553516.7
• 申請日: 2018-06-01
• 公開（公告）號: CN108508215A
• 公開（公告）日: 2018-09-07
• 發明（設計）人: 何方洋;萬宇平;李旭;宋灝;吳小勝;王琳琛;馮才偉;王兆芹;韓光耀;周苑
• 申請（專利權）人: 北京勤邦生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測四環素類藥物的時間分辨熒光免疫層析試紙條，包括試紙和微孔試劑，所述試紙包括底板及在底板上依次搭接粘貼的樣品吸收墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，其特征在于：所述微孔試劑中凍干有熒光微球標記的四環素類藥物單克隆抗體，所述硝酸纖維素膜上固定有檢測區和質控區，所述檢測區噴涂有四環素類藥物半抗原-載體蛋白偶聯物，所述質控區噴涂有羊抗鼠抗抗體；所述四環素類藥物單克隆抗體是以四環素類藥物半抗原-載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得，所述四環素類藥物半抗原-載體蛋白偶聯物是由四環素類藥物半抗原與載體蛋白偶聯得到，所述四環素類藥物半抗原是由四環素與N-(4-氨苯基)馬來酰亞胺反應得到，其分子結構式為：

2.根據權利要求1所述的檢測四環素類藥物的時間分辨熒光免疫層析試紙條，其特征在于：所述熒光微球是直徑為100～300nm的用聚苯乙烯包裹熒光物質的微球，其表面連接有—COOH基團。

3.根據權利要求2所述的檢測四環素類藥物的時間分辨熒光免疫層析試紙條，其特征在于：所述熒光物質為鑭系元素。

4.一種權利要求1-3任一項所述的檢測四環素類藥物的時間分辨熒光免疫層析試紙條的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

1)微孔試劑的制備：用熒光微球標記四環素類藥物單克隆抗體，并將其以特定緩沖體系稀釋后放于微孔中，經真空冷凍干燥后備用；

2)硝酸纖維素膜的制備：將四環素類藥物半抗原-載體蛋白偶聯物噴涂到硝酸纖維素膜上的檢測區范圍，制成檢測區；將羊抗鼠抗抗體噴涂到硝酸纖維素膜上的質控區范圍，制成質控區；

3)組裝和剪切：在底板上依次搭接地粘貼樣品吸收墊、固定有檢測區和質控區的硝酸纖維素膜及吸水墊，并剪切成所需的寬度，配套微孔試劑即為時間分辨熒光免疫層析試紙條。

5.一種權利要求1-3任一項所述的檢測四環素類藥物的時間分辨熒光免疫層析試紙條的應用，其特征在于：包括以下步驟：

1)樣品前處理；

2)用權利要求1-3任一項所述的時間分辨熒光免疫層析試紙條進行檢測；

3)用熒光檢測儀分析檢測結果。