[發明專利]癌癥相關的EB病毒核酸含量檢測試劑盒及方法

在審

• 申請號: 201810551840.5
• 申請日: 2018-05-31
• 公開（公告）號: CN110551625A
• 公開（公告）日: 2019-12-10
• 發明（設計）人: 陳琦;梁昊原;谷東風
• 申請（專利權）人: 深圳市圣必智科技開發有限公司
• 主分類號: C12M1/38
• 分類號: C12M1/38;C12M1/00;C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/93
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種癌癥相關的EB病毒核酸含量檢測試劑盒，包括外殼、內腔以及內托，其特征在于，所述內腔內設置有兩條滑軌，所述內托的四個角底部分別設置一個滑輪，所述內托通過所述滑輪和兩條滑軌活動設置于內腔中，所述內托上設置有以2×4陣列排布的八個檢測凹孔，其中有七個檢測凹孔內插有試劑管，另外一個檢測凹孔為備用孔，其中：

所述試劑管包括裝有RT-PCR反應液的反應試劑管、裝有酶混合液的酶試劑管、裝有EB病毒陰性質控品的陰性對照試劑管、裝有EB病毒陽性質控品的陽性對照試劑管、裝有滅菌雙蒸水的雙蒸水試劑管、裝有ROX校正液的ROX試劑管以及引物探針液試劑管；

在所述內腔中且位于內托的下方安裝有溫度可調的半導體溫控器，所述半導體溫控器的電源線輸入端電連接蓄電池，該半導體溫控器用于將內腔內的環境溫度調節至EB病毒檢測所需溫度以實現試劑保溫。

2.如權利要求1所述的癌癥相關的EB病毒核酸含量檢測試劑盒，其特征在于，所述EB-PCR反應液試劑管的檢測凹孔的孔徑大于另外七個檢測凹孔的孔徑，所述另外七個檢測凹孔的孔徑大小相等，每一個試劑管為滅菌的螺口玻璃管。

3.如權利要求1所述的癌癥相關的EB病毒核酸含量檢測試劑盒，其特征在于，所述內腔還設置有驅動器，該驅動器的電源線輸入端電連接至蓄電池，所述蓄電池為驅動器提供驅動電能。

4.如權利要求3所述的癌癥相關的EB病毒核酸含量檢測試劑盒，其特征在于，所述驅動器包括驅動電機以及電驅動的自由伸縮桿，該自由伸縮桿的一端機械連接至內托的一側，該自由伸縮桿的另一端電連接至驅動電機，當所述驅動電機驅動自由伸縮桿上下伸縮時帶動內托沿著兩條滑軌在所述內腔中自由滑動。

5.如權利要求3所述的癌癥相關的EB病毒核酸含量檢測試劑盒，其特征在于，所述驅動器連接內托相對面一側的外殼開設有滑槽，該滑槽的兩端位置和兩條滑軌的兩端位置相匹配，所述滑槽的高度大于內托的厚度，長度大于內托的寬度。

6.如權利要求3所述的癌癥相關的EB病毒核酸含量檢測試劑盒，其特征在于，所述外殼的表面設置有出倉按鈕和進倉按鈕，所述出倉按鈕和進倉按鈕均電連接至所述驅動器的控制端；當檢測者按下出倉按鈕時，所述驅動器驅動內托穿過滑槽從內腔滑出至試劑盒體外；當檢測者按下進倉按鈕時，所述驅動器驅動內托沿著兩條滑軌穿過滑槽自動推進內腔內。

7.如權利要求1所述的癌癥相關的EB病毒核酸含量檢測試劑盒，其特征在于，所述酶試劑管內裝有的酶混合液為逆轉錄酶和擴增酶。

8.如權利要求1所述的癌癥相關的EB病毒核酸含量檢測試劑盒，其特征在于，所述外殼的內壁涂覆有隔熱層，所述隔熱層由保溫材料制成。

9.一種利用如權利要求1至8任一項所述的試劑盒檢測癌癥相關的EB病毒核酸含量檢測方法，其特征在于，該方法包括步驟：

采用引物探針液試劑管吸取待測樣品；

通過裝有酶混合液的酶試劑管從待測樣品提取病毒RNA，并進行病毒RNA擴增；

裝有EB病毒RT-PCR反應液的反應試劑管進行PCR反應配置EB病毒反應溶液；

將配置完成的EB病毒反應溶液放入熒光PCR檢測儀中進行熒光定量RT-PCR檢測；

熒光定量RT-PCR檢測結束后，熒光PCR檢測儀將自動記錄保存每個循環的熒光信號；

選定熒光通道將熒光信號進行閾值調整，并通過觀察EB病毒的擴增曲線及Ct值進行結果判斷得到EB病毒核酸含量。

10.如權利要求9所述的癌癥相關的EB病毒核酸含量檢測方法，其特征在于，所述EB病毒核酸含量檢測結果按照如下方式判斷：

當Ct值≥30.0或無Ct值時，結果表明待檢測樣品中無EB病毒核酸或其核酸含量低于檢測試劑盒的檢測限值，呈陰性；

當Ct值<30時，結果表明待檢測樣品中含有EB病毒核酸，呈陽性。